EMP-1基因在喉癌中的表達(dá)及對其增殖、凋亡、侵襲的影響研究.pdf

1、前言：
　　喉鱗狀細(xì)胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma，LSCC）是僅次于肺癌的呼吸道第2高發(fā)癌，也是頸部最常見的惡性腫瘤，約占全身惡性腫瘤的1.0％～8.4％，喉癌早期治療效果好，喉功能可保留，且5年生存率可達(dá)90％。流行病學(xué)調(diào)查表明喉癌在我國東北地區(qū)高發(fā)，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，且喉癌的發(fā)生與吸煙、飲酒、寒冷刺激等環(huán)境因素有關(guān)。分子生物學(xué)研究表明，喉癌的發(fā)生、發(fā)展與Ha-ras、Ki-r

2、as、c-myc、EGF受體基因和C-ebr-2基因的擴(kuò)增和過度表達(dá)密切相關(guān)，以及與抑癌基因P53、nm23-HI、P16和Rb的失活有關(guān)。
　　其中上皮細(xì)胞膜蛋白-1基因簡稱EMP-1（epithelial membrane protein-1）基因是在1995年由瑞士學(xué)者Taylor等從胎鼠腸cDNA文庫中克隆出并命名的，又叫:progression associated protein(PAP)、CL-20、TMP、B4B和

3、PMP22外周鞘磷脂蛋白，同屬一個跨膜家族。根據(jù)氨基酸結(jié)構(gòu)推測其定位在細(xì)胞膜上。在鱗狀上皮中富含該基因的mRNA。另有實驗發(fā)現(xiàn)該基因在支管鱗狀上皮細(xì)胞中大量表達(dá)。與此同時，一些相關(guān)研究也證實了EMP-1在胃癌、乳腺癌及子宮平滑肌瘤、腦膠質(zhì)瘤中均有不同程度的高表達(dá)，但也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在食管癌、喉癌、口腔鱗癌中、前列腺癌及鼻咽癌中EMP-1基因的表達(dá)明顯低于正常組織。近來發(fā)現(xiàn)EMP-1在頭頸癌中為下調(diào)基因。
　　EMP-1基因的分子生物學(xué)

4、初步研究結(jié)果顯示，EMP-1基因與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展關(guān)系密切，特別是EMP-1基因可阻止腫瘤進(jìn)一步擴(kuò)增，該基因表達(dá)與細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移特性有關(guān)，EMP-1基因可能是參與細(xì)胞信號傳導(dǎo)、細(xì)胞通信及黏附調(diào)節(jié)的調(diào)節(jié)因子之一，并且表面線粒體凋亡途徑參與了EMP-1誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。然而EMP-1在喉癌中的發(fā)生、發(fā)展以及侵襲、轉(zhuǎn)移中的功能作用、及相關(guān)機(jī)制的研究尚處于空白階段，進(jìn)一步研究EMP-1基因的相關(guān)功能及機(jī)制有可能為喉癌的分子診斷和基因治療提供新的

5、理論依據(jù)和新的策略，這對于處于空白的喉癌分子學(xué)研究有著重大的現(xiàn)實和臨床意義。
　　材料與方法：
　　共取51例喉癌標(biāo)本和其癌旁組織。通過免疫組化、Western Blot、Quantitativereal-time RT-PCR從蛋白水平及mRNA水平檢測不同組標(biāo)本EMP-1的表達(dá)，并分析與各臨床因素之間的相關(guān)性。構(gòu)建EMP-1過表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染喉癌Hep2細(xì)胞系，通過MTT法檢測細(xì)胞的增殖變化、流式細(xì)胞法檢測細(xì)胞的凋亡變化、

6、Transwell法檢測細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移變化情況，明確EMP-1過表達(dá)后對喉癌細(xì)胞產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)。
　　實驗結(jié)果：
　　1、EMP-1在喉癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)
　　免疫組化、Western Blot、RT-PCR結(jié)果顯示，EMP-1在喉癌組織中的蛋白、mRNA的表達(dá)明顯低于癌旁對照組織和良性腫瘤。
　　2、EMP-1對喉癌組織和細(xì)胞的部分生物學(xué)功能
　　EMP-1的過表達(dá)能抑制喉癌細(xì)胞的生長、促進(jìn)喉癌細(xì)胞