MCPH1基因在肺癌中的表達(dá)，及其對(duì)肺癌細(xì)胞遷移、侵襲的影響.pdf

1、目的：
　　肺癌是導(dǎo)致全球癌癥死亡的最主要原因，每年因肺癌死亡的人數(shù)超過1000萬(wàn)，并且每年新增病例120萬(wàn)，主要原因是缺乏有效的針對(duì)肺癌的早期診斷和治療手段。
　　盡管肺癌的放療、化療以及手術(shù)治療在不斷進(jìn)步，但肺癌的五年生存率仍保持在僅僅只有15％，并且在過去的20年里幾乎沒有增加。隨著腫瘤的分子機(jī)制研究的更進(jìn)一步，人們逐漸將目光放在了胸部惡性腫瘤的基因治療方面。不幸的是，大多數(shù)肺癌確診的時(shí)候已經(jīng)發(fā)生了遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，這就要求必

2、須進(jìn)行全身系統(tǒng)治療，而不是局部治療。而應(yīng)用基因療法進(jìn)行全身系統(tǒng)治療仍然十分困難。
　　本研究擬應(yīng)用Real-time PCR和免疫組化的方法對(duì)大量肺癌臨床標(biāo)本進(jìn)行研究，了解MCPH1基因在肺癌組織中的表達(dá)情況。并用劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell實(shí)驗(yàn)觀察MCPH1基因過表達(dá)對(duì)于肺癌A549細(xì)胞遷移和侵襲的影響，同時(shí)加用阿霉素，觀察MCPH1基因過表達(dá)對(duì)于阿霉素敏感性的影響。
　　方法：
　　MCPH1基因表達(dá)情況，分別應(yīng)用

3、定量PCR和免疫組化，對(duì)肺癌組織中MCPH1基因在核酸水平和蛋白水平表達(dá)，進(jìn)行檢測(cè)。肺癌A549細(xì)胞轉(zhuǎn)染后MCPH1表達(dá)檢測(cè):①應(yīng)用Real-time PCR檢測(cè)mRNA表達(dá)。②western-blot檢測(cè)MCPH1蛋白表達(dá)。MCPH1基因?qū)Ψ伟〢549細(xì)胞遷移、侵襲的影響:①劃痕實(shí)驗(yàn)、transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移。②transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲。
　　結(jié)果：
　　MCPH1基因在肺癌組織中表達(dá)下調(diào)。真核質(zhì)粒（p

4、cDNA3.1（-）/MCPH1)轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞后，細(xì)胞內(nèi)MCPH1基因過表達(dá)，說明轉(zhuǎn)染成功。MCPH1基因可以抑制A549細(xì)胞的遷移和侵襲。
　　結(jié)論：
　　本研究表明，MCPH1基因在肺癌發(fā)生、發(fā)展的整個(gè)過程中發(fā)揮一定的作用。鑒于該基因在肺癌和正常肺組織的表達(dá)變化以及其所表現(xiàn)出的對(duì)于肺癌細(xì)胞的遷移、侵襲能力的抑制，該基因在癌癥的整個(gè)過程中，很可能發(fā)揮著一種抑癌基因的功效，其表達(dá)下調(diào)促進(jìn)了癌癥的發(fā)生、發(fā)展。故，MCPH1