常溫氧合血灌注保豬供心的實驗研究.pdf

1、第一部分常溫氧合血灌注保存豬供心模型建立
　　目的:本實驗旨在初步建立供心氧合血灌注保存的動物模型，把握實驗關鍵細節(jié)，借此初步評估此種保存方式與傳統(tǒng)冷藏保存相比是否具有優(yōu)越性。
　　方法:雄性中華小型豬6頭，體重30±3Kg，隨機分為兩組:灌注保存組（MP組），4頭，4℃ST.Thomas液灌停獲取心臟，常溫氧合血連續(xù)灌注保存8h。監(jiān)護儀監(jiān)測心率，CDI500連續(xù)動脈血氣分析儀監(jiān)測保存期間溫度、pH值、PO2、PCO2、Na

2、+濃度、K+濃度、Ca2+濃度，各時間點抽取動脈血監(jiān)測動脈血氣、隨機血糖、ACT。冷藏保存組（CS組），2頭，4℃Celsior液灌停獲取心臟，浸泡在裝有4℃Celsior液的無菌袋中冷藏保存8h。兩組8h后分別取左室心肌組織進行光鏡觀察，取左室心內(nèi)膜組織進行電鏡下超微結構觀察。
　　結果:
　　1 MP組保存的心臟均實現(xiàn)自主節(jié)律復跳，跳動保存8h。
　　2光鏡下觀察，氧合血灌注保存組心肌肌纖維更加整齊，間質無明顯腫脹

3、。
　　3電鏡超微結構觀察，氧合血灌注保存組肌纖維排列整齊，結構整齊清晰，線粒體嵴清晰，Celsior液冷藏保存組線粒體嵴融合，有空泡樣改變，線粒體有增多聚集。
　　結論:供心常溫氧合血灌注保存8h是完全可行的，動物模型成功建立，此種保存方法可以延長供心保存時限。
　　第二部分供心灌注保存與Celsior液冷藏保存心肌超微結構及細胞凋亡的研究
　　目的:常溫氧合血灌注保存8h與Celsior液冷藏保存8h心臟超微

4、結構及細胞凋亡研究對比，驗證氧合血連續(xù)灌注心臟保存與冷藏保存相比是否具有優(yōu)越性。
　　方法:12頭中華小型豬隨機分為兩組:灌注保存組(MP組)，6頭，常溫氧合血連續(xù)灌注保存8h;冷藏保存組（CS組），6頭，浸泡在裝有Celsior液的無菌袋中4℃冷藏保存8h。分別取左室心肌組織進行光鏡觀察，并制作蠟塊，切取白片TUNEL法進行原位細胞凋亡檢測，取左室心內(nèi)膜組織進行電鏡下超微結構觀察。
　　結果:電鏡超微結構觀察，Celsio