人羊膜上皮細(xì)胞移植治療肝硬化大鼠的初步研究.pdf

1、目的:觀察羊膜上皮細(xì)胞在正常免疫大鼠體內(nèi)存活、遷徙及對大鼠肝硬化的治療作用，擬為人羊膜上皮細(xì)胞應(yīng)用于肝硬化治療提供實(shí)驗(yàn)理論。
　　方法:參照文獻(xiàn)提取羊膜上皮細(xì)胞并檢測細(xì)胞總數(shù)、存活率及純度，檢測冰凍復(fù)蘇前后細(xì)胞數(shù)及存活率。80只SD大鼠，完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分五組，移植4×106細(xì)胞約0.4ml懸浮液1周為A組，移植等量細(xì)胞懸浮液2周為B組，移植等量生理鹽水為C組，肝硬化組為D組，空白對照組為E。參照預(yù)實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)肝硬化模型，通過脾實(shí)質(zhì)移植首

2、次將羊膜上皮細(xì)胞注入正常免疫大鼠模型內(nèi)，通過檢測A、B兩組大鼠模型各臟器中人類特有Alu基因重復(fù)序列和白細(xì)胞抗原G是否存在及陽性臟器率的差異，觀察細(xì)胞在體內(nèi)的存活和各臟器中遷徙情況;形態(tài)學(xué)觀察各組臟器;對B、C、D組肝臟行組織學(xué)HE染色，采用Chevallier肝纖維化組織學(xué)半定量計(jì)分系統(tǒng)分析大鼠肝硬化程度;采用免疫組化評分系統(tǒng)半定量檢測B、C、D、E組肝臟中TGF-β1的表達(dá);血清生化儀定量分析B、C、D、E組血清中AST、ALT、A

3、LB水平。
　　結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)提取羊膜上皮細(xì)胞數(shù)平均約為1.1×108/胎盤，存活率及純度分別為84％和91％，凍存復(fù)蘇后的細(xì)胞數(shù)和存活率較前無明顯降低，細(xì)胞可用于實(shí)驗(yàn)研究。經(jīng)脾實(shí)質(zhì)移植羊膜上皮細(xì)胞入完全免疫大鼠體內(nèi)，可于部分心、肝、肺、腎和腦中檢測到Alu基因重復(fù)序列及HLA-G的存在，且B組中肝臟比其余各臟器的陽性臟器率高，P均＜0.05; B組Chevallier評分比其余各組低，P均＜0.05; B組TGF-β1免疫組化評分