海地瓜硫酸多糖抑制脂肪細(xì)胞分化和改善胰島素抵抗作用的研究.pdf

1、海參多糖是海參體壁的重要活性成分之一，包括海參硫酸軟骨素(sea cucumber fucolysated chondroitin sulfate，SC-CHS)和海參巖藻聚糖硫酸酯(sea cucumber fucan, SC-FUC)兩種組分。其中，SC-CHS是一種帶有硫酸酯化巖藻糖支鏈的類(lèi)硫酸軟骨素，主要由D-N-乙酰氨基半乳糖、D-葡萄糖醛酸和L-巖藻糖組成；SC-FUC是一類(lèi)主要由巖藻糖組成的直鏈硫酸多糖，結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單。目前

2、關(guān)于海參多糖改善胰島素抵抗活性的報(bào)道鮮見(jiàn)，且只停留在表象研究，未對(duì)機(jī)制進(jìn)行深入探索。故本論文以海地瓜硫酸軟骨素(Acaudina Molpadioides chondroitin sulfate, AM-CHS)和海地瓜巖藻聚糖硫酸酯(Acaudina Molpadioides fucoidan, AM-FUC)為研究對(duì)象，在體內(nèi)和體外水平系統(tǒng)探討比較了二者抑制脂肪細(xì)胞分化和改善胰島素抵抗的作用及機(jī)制，主要研究結(jié)果如下：
　　采用

3、傳統(tǒng)雞尾酒法建立3T3-L1脂肪細(xì)胞模型，系統(tǒng)研究AM-CHS和AM-FUC抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化作用及機(jī)制。結(jié)果顯示，AM-CHS和AM-FUC均能顯著抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖和分化，且對(duì)分化早期抑制作用最強(qiáng)。羅格列酮是目前治療IR的代表藥物，但存在增重、肥胖等不良反應(yīng)，AM-CHS和AM-FUC亦能顯著拮抗羅格列酮促脂質(zhì)聚積的副作用。RT-PCR結(jié)果顯示，AM-CHS和AM-FUC能夠上調(diào)Wnt信號(hào)通路中關(guān)鍵受體Fr

4、z和LRP5mRNA的表達(dá)、抑制脂質(zhì)合成轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c mRNA的表達(dá)、抑制脂質(zhì)合成酶FAS和GTAP mRNA的表達(dá)、不影響脂質(zhì)分解酶HSL和ATGL mRNA的表達(dá)。提示AM-CHS和AM-FUC是通過(guò)激活經(jīng)典的Wnt信號(hào)通路從而阻滯生脂效應(yīng)，AM-CHS效果優(yōu)于AM-FUC。
　　采用TNF-α誘導(dǎo)法建立3T3-L1胰島素抵抗細(xì)胞模型，系統(tǒng)研究了AM-CHS和AM-FUC改善胰島素抵抗

5、作用及機(jī)制。結(jié)果顯示，AM-CHS和AM-FUC能夠呈時(shí)間劑量依賴(lài)效應(yīng)增強(qiáng)3T3-L1胰島素抵抗細(xì)胞在基礎(chǔ)狀態(tài)、胰島素刺激狀態(tài)和PI3K抑制劑Wortmannin存在狀態(tài)下的葡萄糖攝取，且二者與RSG具有協(xié)同效應(yīng)，AM-CHS效果優(yōu)于AM-FUC。RT-PCR結(jié)果顯示，AM-CHS和AM-FUC均能不同程度的促進(jìn)3T3-Ll胰島素抵抗細(xì)胞中IR、IRS1、PI3K、AKT2和GLUT4 mRNA的表達(dá)。提示AM-CHS和AM-FUC通過(guò)

6、激活PI3K/AKT信號(hào)通路達(dá)到增強(qiáng)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)、改善胰島素抵抗的作用。
　　通過(guò)建立2型糖尿病小鼠模型進(jìn)一步研究了AM-CHS和AM-FUC對(duì)胰島素抵抗的改善作用。結(jié)果顯示，AM-CHS和AM-FUC可顯著降低2型糖尿病小鼠體重、空腹血糖和胰島素水平，提高血清脂聯(lián)素含量，降低抵抗素、瘦素和TNF-α含量，改善胰島素抵抗，且AM-CHS和AM-FUC與RSG具有協(xié)同作用。提示AM-CHS和AM-FUC能顯著改善2型糖尿病小鼠的胰島素