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文檔簡介
1、目的:探討B(tài)7-H4巨噬細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)與卵巢癌愈后的相關(guān)性。
方法:1.免疫磁珠及流式細(xì)胞儀分選出正常人單核細(xì)胞、新鮮的卵巢癌組織、卵巢癌巨噬細(xì)胞及Treg細(xì)胞。2.免疫熒光法檢測卵巢癌組織B7-H4蛋白的表達(dá)。3.RT-PCR檢測卵巢癌組織中B7-H4基因的表達(dá)。4.ELISA檢測卵巢癌患者免疫微環(huán)境中細(xì)胞因子IL-4,IL-6,IL-10,和GM-CSF的表達(dá)。5.抗IL-6和IL-10干擾后采用RT-PC
2、R或FACS檢測B7-H4在基因和蛋白水平的表達(dá)。6.Treg和單核細(xì)胞共培養(yǎng)后ELISA檢測相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)。
結(jié)果:1.原代卵巢癌細(xì)胞上 B7-H4的表達(dá)與其臨床和病理特征并無關(guān)系。2.B7-H4+巨噬細(xì)胞在卵巢癌的進(jìn)展期數(shù)量明顯增多。3.卵巢癌相關(guān)巨噬細(xì)胞而非原代卵巢癌細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子 IL-6和 IL-10。4.卵巢癌相關(guān)巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的B7-H4的表達(dá)能夠被抗IL-6和IL-10所阻斷。5.Treg刺激卵巢癌相關(guān)巨噬
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