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文檔簡介
1、目的:觀察法舒地爾(HF)對體外培養(yǎng)的人內皮祖細胞(EPCs)作用及對心肌梗死模型大鼠移植EPCs后心功能的影響,并探討相關機制。
方法:(1)抽取健康志愿者和急性心肌梗死患者(發(fā)病12h內)外周血,利用差速貼壁法提取單個核細胞并培養(yǎng)內皮祖細胞,觀察EPCs分化、增殖、凋亡及血管形成能力的變化,并觀察法舒地爾(HF)對EPCs體外培養(yǎng)的影響;(2)選用SD大鼠60只制備心肌梗死模型,將模型成功的心梗大鼠隨機分為四組:①對照組,
2、腹腔注射生理鹽水;②HF組,腹腔注射HF10mg/kg;③EPCs移植組,心肌內移植EPCs;④EPCs移植+HF組,心肌內移植EPCs并腹腔內注射HF(10mg/kg)。普食飼養(yǎng)14天。應用敲除小鼠β-半乳糖苷酶的來鑒別移植后的EPCs,通過培養(yǎng)敲除β-半乳糖苷酶基因小鼠外周血EPCs,并移植入心肌梗死模型大鼠的心肌內。檢測各組心肌血流量(RMBF)、血管密度、纖維化程度及心功能。
結果:(1)差速貼壁篩選法獲得并成功培養(yǎng)急
3、性心肌梗死患者外周血中的EPCs,加入HF聯(lián)合培養(yǎng)后,細胞的分化、增殖及血管形成能力明顯高于未加入 HF組(p<0.05),而細胞凋亡則低于未加入 HF組(p<0.05);(2)EPCs移植+HF組的心肌血流量、新生血管密度增加,心肌纖維化程度降低。左心室舒張末內徑(LVEDD)和收縮末的內徑(LVESD)明顯減?。╬<0.05),射血分數(shù)(EF)提高,心功能有一定改善。
結論:(1)利用差速貼壁篩選法提取單個核細胞,成功分選
4、并培養(yǎng)了不同時期的EPCs。(2)法舒地爾對心肌梗死患者體外EPCs培養(yǎng),可促進細胞分化、增殖,降低細胞凋亡并提高血管形成能力。(3)法舒地爾對EPCs移植的心肌梗死大鼠,可增加其心肌血流量、心肌血管密度,降低心肌纖維化程度,進而改善心功能。(4)法舒地爾對體外EPCs培養(yǎng)和體內EPCs移植實驗的效應,提示法舒地爾作為Rho激酶抑制劑,可能通過抑制Rho激酶的表達,提高內皮細胞eNOS的活性,輔助改善心肌梗死EPCs移植后的微環(huán)境,使E
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