miRNA-221在精氨酸影響大鼠動(dòng)脈粥樣硬化中的作用.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開論述：
　　第一部分 精氨酸對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠主動(dòng)脈miRNA-221、eNOS的表達(dá)影響
　　目的:(1)研究精氨酸在SD大鼠動(dòng)脈粥樣硬化形成中的預(yù)防及治療作用;(2)miRNA-221、一氧化氮合酶在精氨酸干預(yù)SD大鼠動(dòng)脈粥樣硬化形成中的作用。
　　方法:(1)將60只SD大鼠分成6組:普通組10只、高脂組10只、精氨酸預(yù)防組10只、精氨酸治療組10只、辛伐他汀組10只、聯(lián)合治療組10只，

2、除普通組外其余5組給予高脂飲食（精氨酸預(yù)防組加用精氨酸）12周。12周后，普通組和高脂組給予生理鹽水、精氨酸預(yù)防組和精氨酸治療組給予精氨酸注射液、辛伐他汀組給予辛伐他汀片、聯(lián)合治療組給予精氨酸注射液和辛伐他汀片灌胃12周，處死大鼠。(2)檢測(cè)6組大鼠血清hs-CRP，取各組大鼠主動(dòng)脈制作常規(guī)HE染色病理切片。(3)采用real-time PCR方法檢測(cè)各組大鼠主動(dòng)脈miRNA-221表達(dá)量，western blot檢測(cè)大鼠主動(dòng)脈eNOS

3、的表達(dá)量。
　　結(jié)果:(1)主動(dòng)脈常規(guī)病理提示除普通組外，其余5組主動(dòng)脈內(nèi)膜厚度均增加，精氨酸治療組、精氨酸預(yù)防組、辛伐他汀組、聯(lián)合治療組內(nèi)膜厚度增加程度均較高脂組減輕，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。(2)hs-CRP水平在高脂飲食的5組大鼠中均增加，較普通飲食組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。其中，精氨酸治療組、精氨酸預(yù)防組、辛伐他汀組、聯(lián)合治療組hs-CRP水平較高脂組降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。(3)miRNA-2

4、21表達(dá)在高脂飲食的5組較普通組明顯升高，其中，精氨酸預(yù)防組、辛伐他汀組、聯(lián)合治療組miRNA-221表達(dá)較高脂組降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05); eNOS水平在高脂飲食的5組較普通組明顯降低，其中，精氨酸預(yù)防組、辛伐他汀組、聯(lián)合治療組miRNA-221表達(dá)較高脂組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　結(jié)論:(1)大鼠可以通過高脂飲食成功建立動(dòng)脈粥樣硬化模型，口服精氨酸可以減輕高脂飲食大鼠血管內(nèi)皮炎癥反應(yīng)、減輕內(nèi)膜

5、增厚，延緩動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展。(2)精氨酸抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制除了提高底物濃度增加NO途徑外，尚可能通過下調(diào)主動(dòng)脈miRNA-221表達(dá)，進(jìn)而提高主動(dòng)脈eNOS水平從而發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，這有待于在細(xì)胞水平上得到進(jìn)一步驗(yàn)證。
　　第二部分 原代培養(yǎng)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞miRNA-221對(duì)eNOS表達(dá)情況的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:驗(yàn)證大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞miRNA-221是否可以調(diào)節(jié)eNOS表達(dá)。
　　方法:原代培養(yǎng)的S

6、D大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞，分為對(duì)照組、拮抗組和陰性對(duì)照組，分別加入Lipfectamine2000、antagormiR-221與Lipfectamine2000混合液、miRNA-221NC與Lipfectamine2000混合液轉(zhuǎn)染干預(yù)，real-time PCR方法檢測(cè)各組內(nèi)皮細(xì)胞eNOS mRNA、western blot檢測(cè)各組內(nèi)皮細(xì)胞eNOS的表達(dá)量。
　　結(jié)果:拮抗組大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞eNOS mRNA及eNOS蛋白表達(dá)