PPARβ-δ在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中作用及機(jī)制的研究.pdf

1、第一部分：PPARβ/δ在兔動(dòng)脈粥樣硬化模型中的表達(dá)及作用
　　研究目的：
　　研究過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR）-β/δ在兔動(dòng)脈粥樣硬化模型中的表達(dá)水平和作用方式。
　　研究方法：
　　35只雄性新西蘭大白兔分為對(duì)照組（5只）、高脂組（15只）和高脂+球囊損傷組（15只），后兩組進(jìn)一步分為6周、8周、10周組，每組5只。對(duì)照組給予標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，高脂組給予含88％的標(biāo)準(zhǔn)飼料、10%的豬油和2%的膽固醇的高

2、脂飼料喂養(yǎng)，高脂+球囊損傷組給予球囊拉傷右側(cè)股動(dòng)脈后給予高脂飼料喂養(yǎng)。采用實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)PPARβ/δ和單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP)-1 mRNA的水平；免疫組織化學(xué)法（IHC）檢測(cè)PPARβ/δ蛋白的水平；蛋白質(zhì)印跡法（WB）檢測(cè)PPARβ/δ和MCP-1蛋白的表達(dá)；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定兔血清中炎癥因子腫瘤壞死因子（TNF）-α，白介素(IL)-10和MCP-1的水平。
　　研究結(jié)果：
　　高脂組和高脂

3、+球囊損傷組的PPARβ/δ蛋白質(zhì)和mRNA水平顯著高于對(duì)照組，且兩組間在同一時(shí)間點(diǎn)的PPARβ/δ蛋白質(zhì)和mRNA的表達(dá)也有明顯差異(P<0.01)。除了高脂6周組外(P＞0.05)，MCP-1蛋白質(zhì)和mRNA水平在各組之間也有明顯差異(P<0.01)。此外，從4-10周，高脂組和高脂+球囊損傷組血清TNF-α、MCP-1和IL-10的濃度明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，炎癥因子的水平逐漸升高。
　　結(jié)論：

4、r>　　PPARβ/δ可能參與動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程并發(fā)揮重要作用。
　　第二部分：PPARβ/δ及其配體在RAW264.7泡沫細(xì)胞模型中的作用
　　研究目的：
　　研究PPARβ/δ及其激動(dòng)劑GW0742、抑制劑 GSK0660在RAW264.7泡沫細(xì)胞模型中的作用。
　　研究方法：
　　本研究選用RAW264.7細(xì)胞，共分為6組，分別是對(duì)照組、LPS組、ox-LDL組、模型組、激動(dòng)劑組和抑制劑組。實(shí)時(shí)定量P

5、CR用來(lái)檢測(cè)PPARβ/δ和單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP)-1 mRNA的水平，蛋白質(zhì)印跡法(WB)檢測(cè)PPARβ/δ和MCP-1蛋白的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液上清中炎癥因子腫瘤壞死因子(TNF)-α，白介素(IL)-10和MCP-1的水平。
　　研究結(jié)果：
　　對(duì)照組、LPS組、ox-LDL組、模型組、激動(dòng)劑組的PPARβ/δ蛋白質(zhì)和mRNA水平有增加的趨勢(shì)(P<0.01)，而抑制劑組 PPARβ/δ

6、蛋白質(zhì)和mRNA水平則明顯低于模型組和激動(dòng)劑組(P<0.01)。MCP-1蛋白質(zhì)和mRNA的水平在對(duì)照組、ox-LDL組、LPS組、模型組明顯增加(P<0.01)，而激動(dòng)劑組則明顯降低(P<0.01)，抑制劑組又有所增加(P<0.01)?？傊?，MCP-1的蛋白質(zhì)和mRNA水平在各組之間差異顯著(P<0.01)。細(xì)胞培養(yǎng)液中TNF-α、MCP-1的水平LPS組、ox-LDL組、模型組明顯升高(P<0.01)，而激動(dòng)劑組明顯降低(P<0.0