用低毒病毒—板栗疫病菌系統(tǒng)篩選抗病毒化合物的模型研究.pdf

1、藥物篩選模型是用于證明某種物質(zhì)具有藥理活性(生物活性、治療作用)的實(shí)驗(yàn)方法，這些實(shí)驗(yàn)方法是尋找和發(fā)現(xiàn)藥物的重要條件之一。理想的篩選方法應(yīng)該具有明顯的檢測(cè)標(biāo)記，而且高效、簡(jiǎn)便。但是對(duì)大多數(shù)RNA病毒而言，理想的篩選方法還非常缺乏。尤其在抗植物病毒和真菌病毒病的藥物開(kāi)發(fā)方面，目前還沒(méi)有簡(jiǎn)易、快速和高效的篩選方法。
　　 無(wú)病毒的絲狀真菌板栗疫病菌具有桔黃色的表型，而感染了低毒病毒(一種雙鏈RNA病毒)的板栗疫病菌則具有菌絲體為白色的

2、穩(wěn)定的表型。當(dāng)帶毒株失去可自主復(fù)制的低毒病毒時(shí)，菌絲體變?yōu)榻埸S色。
　　 本實(shí)驗(yàn)利用這種顏色變化作為判斷病毒存在與否或其濃度水平的一個(gè)方便的初步標(biāo)記。用市面有代表性的廣譜抗病毒藥物處理這種帶病毒菌株，然后根據(jù)用藥前后菌株顏色的變化，以及對(duì)用藥前后病毒進(jìn)行熒光定量分析，從而判斷所用藥物對(duì)RNA病毒的復(fù)制是否有抑制作用，或?qū)κ躌NA病毒感染的真菌的癥狀是否有緩解作用。
　　 結(jié)果表明，在該系統(tǒng)中，抗病毒藥物對(duì)帶病毒株系處理后

3、，菌絲體顏色表型變化最為明顯，熒光定量結(jié)果表明病毒量的變化與菌絲體顏色變化存在相關(guān)性，即隨著藥物濃度的增加，菌絲體顏色逐漸加深，而病毒dsRNA的量則相對(duì)減少。其中在EP721/EP721(-)系統(tǒng)中最為明顯，Euro7/Euro7(-)系統(tǒng)中次之，而由于EP713中所帶病毒量較大，使得同樣藥物的量對(duì)其影響較小，因此在EP713/EP155系統(tǒng)中菌絲體顏色表型變化以及病毒量的變化不甚明顯。但考慮到EP721有脫毒的可能性，因此認(rèn)為Eur