熱休克腫瘤細胞上清及EXOSOME中趨化因子的發(fā)現(xiàn)及一種非細胞結構性新型高效腫瘤疫苗的研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學博士學位論文熱休克腫瘤細胞上清及EXOSOME中趨化因子的發(fā)現(xiàn)及一種非細胞結構性新型高效腫瘤疫苗的研究姓名：郭軍申請學位級別：博士專業(yè)：免疫學指導教師：曹雪濤2002.5.1a熱休克I中擅細胞上滑丑Exos0Ⅶi中趨化西干的發(fā)現(xiàn)＆一砷菲細胞結殉陛妒坐商啦J|【l：描蛙苗的研究”熱休克腫瘤細胞上清及EXOSOME中趨化因子的發(fā)現(xiàn)及一種非細胞結構性新型高效腫瘤疫苗的研究博士生：郭軍導師：曹雪濤教授中文摘要／l惡性腫瘤嚴重威脅著人

2、類的健康，在各種疾病所致的死亡中，惡陛腫瘤現(xiàn)已＼成為主要病因，并有進～步增高的趨勢。目前的傳統(tǒng)治療方法，雖有一定療效，但卻十分有限。生物治療的研究給腫瘤治療帶來了新的希望，特別是腫瘤疫苗的研制更成為目前腫瘤治療研究的熱點之一。現(xiàn)有的比較受到關注的制備腫瘤疫苗的方法，包括了如各種細胞因子、共刺激分子、刪q蕾抗原肽等基因修飾的腫瘤細胞疫苗；體外抗原致敏的或月qt瘤抗原肽基因修飾的樹突狀細胞疫苗；腫瘤細胞與抗原提呈細胞融合疫苗等。這些腫瘤疫苗

3、各有特色，但總體來說，制備工藝復雜，效果相對不夠理想。我們在研究熱休克蛋白與腫瘤免疫之間的關系時，發(fā)現(xiàn)了腫瘤細胞經(jīng)熱體克后，其培養(yǎng)上清對樹突狀細胞(Dendriticcell，DC)及T淋巴細胞有明顯的趨化作用，繼而證實了腫瘤細胞熱體克后上清中含有多種趨化因子。由于這種趨化作用在熱休克后很快就表現(xiàn)出來，因而我們推測可能是腫瘤細胞通過某種特殊的分泌形式，將趨化因子排出胞外。進一步的實驗證實這種外排形式就是ExOSO～／E，因為我們發(fā)現(xiàn)腫瘤

4、細胞熱休克上清中的EXOSOME含有多種高濃度的趨化因子，而分離出EXOSOME后的上清中卻幾乎檢測不到趨化因子。同時，我們還發(fā)現(xiàn)了在熱休克后EXOSOME中含有高水平的MHCI類和II類分子以及多種共刺激分子、粘附分子、腫瘤抗原提呈的伴侶分子HSP70等。由于這種EXOSO～IE來自于腫瘤細胞，攜帶有腫瘤抗原，又有幾乎所有目前研制的高教腫瘤疫苗所必須的公刺激信號的特性，強烈提示這是一種非細胞性的新型疫苗。接著進行的動物體內實驗證實這種