慢病毒載體介導的ANNEXIN A10瘤內(nèi)注射對HepG2細胞皮下移植瘤抑制作用的研究.pdf

1、學位論文獨創(chuàng)性聲明學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南昌大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名( 手寫) ：枷撕 簽字日期：。2 口似年6 月7 日學位論文版權使用授權書本學

2、位論文作者完全了解南昌大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權南昌大學可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所和中國學術期刊( 光盤版) 電子雜志社將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡向社會公眾

3、提供信息服務。( 保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者簽名( 手寫) ： 導師簽名( 手寫)例橢簽字日期：p 護他年6 月7 日：峨簽字日期：滬c 筍勺6 月◇了日摘要目的：摘要1 、構建人肝癌細胞株H e p G 2 裸鼠皮下移植瘤模型；2 、觀察重組A N X A l 0 過表達慢病毒對H e p G 2 裸鼠皮下移植瘤體生長情況的影響及其對移植瘤細胞中基質金屬蛋白酶．9 ( m a t r i x m e t a l

4、l o p r o t e i n a s e 一9 ，M M P ．9 ) 、血管內(nèi)皮生長因子( v a s c u l a r e n d o t h e l i a lg r o w t hf a c t o r ，V E G F ) 表達的影響。初步闡明A N X A l 0 基因對人肝癌細胞株H e p G 2 裸鼠皮下移植瘤瘤體增殖、凋亡的影響及肝癌侵襲及轉移相關的細胞因子M M P ．9 、V E G F 的影響。方法：1

5、 、制備濃度為1 ×1 0 7 個／m l 的H e p G 2 細胞懸液，取O ．2 m l 細胞懸液注入裸鼠右側腋下。2 4 天后，瘤體最大直徑長至1 ．7 —2 ．0 c m 時，取出瘤體，剪成l m m x l m m x l m m 大小組織塊，分別接種至2 4 只雌性裸鼠右側腋窩皮下，每3天測量瘤體大小，計算瘤體體積。2 、組織塊移植后7 天，瘤體直徑長至O ．3 ．0 ．5 c m 時，將裸鼠隨機分為3 組，分別

6、命名為實驗組( L v ．A N X A l 0 組) 、陰性對照組( 空載慢病毒組) 、空白對照組。每只動物給予慢病毒量為2 x 1 0 7 T U ( 1 0 0 u 1 ) ，空白對照組給予等量的P B S ；3 h 后重復注射一次。4 周后處死2 4 只裸鼠，并取出裸鼠皮下瘤體。采用R T —P C R在分子水平檢測A N X A l 0 基因m R N A 的變化，采用免疫組化在組織層面檢測A N X A l 0 蛋白的表達，

7、并運用同樣的方法分別從基因和／或組織水平檢測M M P 9 、V E G F 表達的變化。t u n e l 法檢測各組瘤體細胞凋亡情況。結果：1 、成功構建人肝癌細胞株H e p G 2 裸鼠皮下移植瘤模型2 、實驗組裸鼠皮下移植瘤生長明顯受抑制，體積和重量均明顯小于陰性對照組和空白對照組( 體積：F = 1 9 ．1 3 ，P < O ．0 1 ；重量：F = 4 6 ．9 1 ，P < O ．0 1 )3 、半定量P