鴨α干擾素真核表達(dá)質(zhì)粒對DVH弱毒疫苗免疫鴨細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、為檢測鴨α干擾素(IFN-α)真核表達(dá)質(zhì)粒(pcDNA-DuIFN-α)對DVH弱毒苗免疫鴨的細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用，本實(shí)驗(yàn)將鴨α干擾素真核表達(dá)質(zhì)粒(pcDNA-DuIFN-α)以50μg、100μg、200μg肌肉注射和1μg、3μg、6μg基因槍轟擊分別免疫28日齡北京鴨，15 d后免疫鴨病毒性肝炎(DVH)弱毒疫苗，同時設(shè)空載體+DVH弱毒疫苗、生理鹽水、DVH弱毒疫苗以及pcDNA-DuIFN-α免疫鴨對照組，10只/組，于DVH弱毒

2、疫苗免疫后5、7、14、21、28、42、56、70 d采用流式細(xì)胞儀(FACS)、淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)(MTT法)分別對免疫鴨外周血的CD3<'+>淋巴細(xì)胞總數(shù)、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力進(jìn)行動態(tài)檢測，取得如下實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1．CD3<'+>淋巴細(xì)胞數(shù)量： ①肌肉注射：50μg、100μg和200μg的pcDNA-DuIFN-α分別與DVH弱毒疫苗聯(lián)合免疫后7-56 d極顯著(P≤0.01)高于生理鹽水對照鴨，7-42 d，100μ

3、g組極顯著(P≤0.01)、50μg和200μg組顯著高于(P≤0.05)空載體+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α組。100μg組于7-42 d顯著(p≤0.05)高于50μg和200μg組，50μg組于14-28 d略高于200μg組。 ②基因槍轟擊：1μg、3μg和6μg的pcDNA-DuIFN-α分別與DVH弱毒疫苗聯(lián)合免疫后7-56 d極顯著(P≤0.01)高于生理鹽水對照鴨，3μg組于21-

4、56 d、1μg和6μg組于21 d極顯著(P≤0.01)高于空載體+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α組，3μg組于28-42 d略高于1μg和6μg組，1μg組于7-14和28-56 d略高于6μg組。 ③肌肉注射和基因槍轟擊的比較：100μg肌肉注射組于14-21 d顯著(P≤0.05)高于基因槍轟擊的3個劑量組；1μg、3μg和6μg基因槍組于21 d顯著(P≤0.05)高于200μg肌肉注射組

5、。 ④對照組間的比較：DVH弱毒疫苗、pcDNA-DuIFN-α和空載體+DVH弱毒疫苗組間差異不顯著，于7-56 d極顯著(P≤0.01)高于生理鹽水對照組。 2．T淋巴細(xì)胞對ConA的反應(yīng)能力(OD值)： ①肌肉注射：50μg、100μg和200μg的pcDNA-DuIFN-α分別與DVH弱毒疫苗聯(lián)合免疫后5-70 d極顯著(P≤0.01)高于生理鹽水對照鴨，21-56 d極顯著(P≤0.01)高于空載體+D

6、VH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α組。50μg、100μg和200μg組間差異不明顯，5-14 d和28-42 d時50μg和100μg組略高于200μg組。 ②基因槍轟擊：1μg、3μg和6μg的pcDNA-DuIFN-α分別與DVH弱毒疫苗聯(lián)合免疫后5-70 d極顯著(P≤0.01)高于生理鹽水對照鴨，3μg組于14-42 d極顯著(P≤0.01)、1μg和6μg組于21-42 d顯著(P≤0.05)

7、高于空載體+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α組，3μg組于14-42 d顯著(P≤0.05)高于1μg和6μg組，1μg和6μg組差異不顯著，14-28 d，6μg組略高于1μg組。 ③肌肉注射和基因槍轟擊的比較：3μg基因槍轟擊組于21 d略高于肌肉注射的3個劑量組，50μg和100μg肌肉注射組于28-70 d、200μg組于42-70 d顯著(P≤0.05)高于1μg和6μg基因槍轟擊組。

8、 ④對照組間比較：DVH弱毒疫苗、pcDNA-DuIFN-α和空載體+DVH弱毒疫苗組間差異不顯著于5-56 d極顯著(P≤0.01)高于生理鹽水對照組，DVH弱毒苗和空載體+DVH弱毒苗組于14-42 d略高于pcDNA-DuIFN-α組，空載體+DVH弱毒苗組于21-56 d略高于DVH弱毒苗組。 研究表明，鴨α干擾素真核表達(dá)質(zhì)粒能顯著增強(qiáng)鴨細(xì)胞免疫力，并能顯著增強(qiáng)DVH弱毒疫苗誘導(dǎo)的鴨細(xì)胞免疫力，是一種優(yōu)良的細(xì)胞免疫分子