哈蟆油HPLC指紋圖譜的研究及其在真?zhèn)舞b別中的應(yīng)用.pdf

1、本課題“哈蟆油HPLC指紋圖譜的研究及其在真?zhèn)舞b別中的應(yīng)用”是哈蟆油系統(tǒng)質(zhì)量控制方法中的一部分，是對現(xiàn)有哈蟆油質(zhì)控方法的必要補(bǔ)充。旨在通過高效液相色譜法對哈蟆油樣品進(jìn)行研究，建立哈蟆油HPLC指紋圖譜的共有模式，達(dá)到有效控制其質(zhì)量的目的。 本實(shí)驗(yàn)共收集到了18批待研究樣品，其中正品哈蟆油15批，偽品哈蟆油(即青蛙與蟾蜍的輸卵管)3批。通過系統(tǒng)溶劑法對正品哈蟆油進(jìn)行提取，從中選擇了95％乙醇作為哈蟆油HPLC指紋圖譜研究的提取溶劑

2、；結(jié)合紫外全波長掃描和試驗(yàn)的結(jié)果，我們選擇了209nm作為檢測波長；經(jīng)過對大量流動(dòng)相系統(tǒng)的考察，確定了乙腈—0.5％磷酸水溶液為其流動(dòng)相，采取非線性的梯度洗脫。最后確定哈蟆油HPLC指紋圖譜的色譜條件為：色譜柱：Kromasil C18(5<'μ> 100A TiANttE? TH 1025 250mm×4.6mmS/N：06L25514)；流動(dòng)相：乙腈一0.5％磷酸水溶液；柱溫：室溫；檢測波長：209nm；進(jìn)樣量為15μl。在已篩選的

3、色譜條件下，35分鐘內(nèi)就完成了哈蟆油HPLC指紋圖譜的檢測。用此方法對其余樣品分別測定，并應(yīng)用指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)軟件對各樣品圖譜信息進(jìn)行處理，最后選出11批優(yōu)質(zhì)正品哈蟆油樣品生成哈蟆油HPLC指紋圖譜共有模式，從中選出12個(gè)重復(fù)性好的色譜峰作為哈蟆油HPLC指紋圖譜的特征峰。將生成的對照指紋圖譜與偽品哈蟆油HPLC圖譜進(jìn)行比較，即可判斷出真?zhèn)巍＝?jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，表明該方法具有良好的專屬性、準(zhǔn)確度、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)健性，測定范圍在25μ