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文檔簡介
1、目的:觀察銀杏葉提取物(extract of ginkgo biloba, GBE)對高糖培養(yǎng)的大鼠晶狀體渾濁的防治作用。
方法:M199培養(yǎng)液培養(yǎng)分離的大鼠晶狀體組織,將離體晶狀體分為正常對照組(NS組,葡萄糖終濃度2.40 mmol/L);高糖組(HG組,葡萄糖終濃度52.4mmol/L);GBE低劑量組(GL組,10μg/ml GBE-HG培養(yǎng)基),GBE中劑量組(GM組,20μg/ml GBE-HG培養(yǎng)基),GBE高劑
2、量組(GH組,40μg/ml GBE-HG培養(yǎng)基),芐達賴氨酸(bendazac lysine,BDL)對照組(BDL組,0.5μmol/L BDL-HG培養(yǎng)基)。培養(yǎng)5d后收集晶狀體組織。CCD顯微鏡觀察大鼠晶狀體渾濁情況,并用NIH Image J圖像處理軟件計算離體培養(yǎng)晶狀體圖像灰度值;可見光分光光度法測定過氧化氫酶(catalase,CAT),谷胱甘肽(glutathione,GSH)和總超氧化物歧化酶(total supero
3、xide dismutase,T-SOD)三種抗氧化指標的水平;熒光分光光度法測定AGEs含量;ELISA法測定晶狀體中TGF-β2(transforming growth factor-β2)的含量;Real-Time PCR測定TGF-β2、α-SMA、E-cadherin mRNA的水平;免疫印跡法測定醛糖還原酶(aldose reductase,AR)、Smad2/3、 E-cadherin、α-SMA(alpha-sooth
4、muscle actin)蛋白表達水平。
結果:在離體培養(yǎng)的晶狀體組織上,NS組晶狀體清亮、透明,HG組的晶狀體與NS組相比渾濁度明顯增高(P<0.01),GBE中、高劑量組明顯減輕了高糖誘導的晶狀體渾濁(P<0.01)。與NS組比較,HG組晶狀體組織中抗氧化酶活力明顯降低(P<0.01)、AGEs含量及AR蛋白表達顯著增高(P<0.01);且TGF-β2、Smad2/3、α-SMA的蛋白水平表達明顯升高(P<0.01);而E
5、-cadherin顯著降低(P<0.01)。與HG組相比,GM、GH組的大鼠CAT、T-SOD和GSH酶活力明顯增強(P<0.05或P<0.01),GM、GH組的大鼠AGEs含量和AR蛋白表達明顯降低(P<0.05或P<0.01),GBE三個劑量組和BDL組均可降低晶狀體內TGF-β2、Smad2/3、α-SMA表達水平(P<0.01或P<0.05),并升高E-cadherin的表達。
結論:GBE可能通過增強晶狀體的抗氧化能
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