銀杏葉提取物對全腦缺血再灌注損傷大鼠的保護作用.pdf

1、目的：研究銀杏葉提取物(EGb761)對全腦缺血再灌注損傷大鼠的保護作用,并探討其可能的作用機制。
　　 方法：用四血管法建立大鼠全腦缺血再灌注模型,觀察EGb761對全腦缺血再灌注損傷大鼠的的影響。
　　 第一部分:40只雄性SD大鼠,隨機分為假手術組、缺血再灌注組(IR組)、小劑量EGb761治療組(EGb6.25組)、中劑量EGb761治療組(EGb12.5組)和大劑量EGb761治療組(EGb25組),每組8只。

2、缺血20分鐘再灌注6小時后,觀察各組大鼠腦組織含水量,采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血清SIOOB蛋白水平,采用比色法測定血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。
　　 第二部分:32只雄性SD大鼠,隨機分為假手術組、缺血再灌注組(IR組)、EGb761治療組(Egb組)和EGb761+LY294002組(Egb+LY組),每組8只。缺血20分鐘再灌注12小時后,采用原位末端轉移酶標記(TUNEL)的方法觀察海

3、馬區(qū)神經細胞凋亡情況,免疫組化的方法觀察海馬區(qū)神經細胞bcl-2、bax、Akt和p-Akt蛋白的表達。
　　 結果：
　　 第一部分:IR組和各劑量EGb761治療組的腦組織含水量均明顯高于假手術組(P＜0.05);EGb25組腦組織含水量78.8±0.52％,EGb12.5組腦組織含水量79.2±0.60％,均明顯低于IR組80.1±0.50％(P＜O.05)。IR組和各劑量EGb761治療組的血清S1OOB、MDA

4、和SOD水平與假手術組相比均有明顯差異(P＜0.05);EGb25組SIOOB為2.2062±0.6986ng/ml,明顯低于IR組(3.6186±0.6206ng/ml)(P＜0.05);EGb25組MDA為3.4375±0.3925nmol/ml,Egb12.5組MDA為3.8052±0.3640nmol/ml,均明顯低于IR組(4.3382±0.4085nmol/ml)(P＜0.05);EGb25組SOD為178.4580±9.4

5、253U/ml,EGbl2.5組SOD為166.2477±7.9979U/ml,均明顯高于IR組(154.7418±9.6684U/ml)(P＜0.05)。
　　 第二部分:IR組海馬區(qū)TUNEL陽性細胞數(shù)、平均光密度值分別為26.97±5.04％和0.0508±0.0119,明顯高于假手術組的2.27±0。71％(P＜0.05)和0.0167±0.0056(P＜0.05);Egb組和Egb+LY組海馬區(qū)TUNEL陽性細胞數(shù)、平

6、均光密度值分別為15.67±4.75％、0.0288±0.0077和18.33±4.94％、0.0316±0.0151,均明顯低于IR組(P＜0.05);Egb組海馬區(qū)的TUNEL陽性細胞數(shù)、平均光密度值與Egb+LY組比較無顯著差異。Egb組和Egb+LY組海馬區(qū)bcl-2陽性細胞數(shù)、平均光密度值分別為21.61±5.75％、0.0754±O.0190和18.86±4.02％、0.0707±0.0212,均明顯高于IR組的10.89±

7、3.23％(P＜0.05)和0.0484±0.0127(P＜0.05);Egb組和Egb+LY組海馬區(qū)bax陽性細胞數(shù)、平均光密度值分別為18.69±5.65％、0.0603±0.0169和17.55±4.60％、0.0644±0.0148,均明顯低于IR組的25.18±4.31％(P＜0.05)和0.0804±0.0149(P＜0.05);Egb組和Egb+LY組bcl-2/bax比值為1.16和1.07,較IR組(0.43)均明顯增

8、高;Egb組海馬區(qū)的bcl-2和bax陽性細胞數(shù)、平均光密度值與Egb+LY組比較無顯著差異。IR組p-Akt蛋白表達陽性細胞數(shù)和平均光密度值為27.81±7.04％、0.0443±0.0119,較假手術組有所升高(13.43±3.14％、0.0316±0.0111);Egb組和Egb+LY組海馬區(qū)p-Akt陽性細胞數(shù)、平均光密度值分別為69.83±10.18％、0.0670±0.0143和61.50±12.07％、0.0605±0.0

9、175,均明顯高于IR組;Egb組海馬區(qū)的p-Akt陽性細胞數(shù)、平均光密度值與Egb+LY組比較無顯著差異。各組總Akt平均光密度值無顯著差異。
　　 結論：第一部分:EGb761對鼠全腦缺血再灌注損傷有保護作用,并呈劑量依賴性,其機制可能與抗自由基損傷有關。第二部分:EGb761可抑制全腦缺血再灌注損傷導致的神經元凋亡,該作用可能與增加抗凋亡蛋白bcl-2的表達和減少促凋亡蛋白bax的表達、增加bcl-2/bax比值有關,其抗