青貯中紅三葉蛋白質(zhì)的降解及其與苜蓿的比較.pdf

1、本研究比較了實驗室條件下紅三葉和苜蓿青貯過程中各項指標的變化，研究了紅三葉中多酚氧化酶的基本特性，測定了不同品種紅三葉不同生育期不同器官中多酚氧化酶的活性、總酚含量和褐變性的變化，同時探討了紅三葉青貯過程中蛋白質(zhì)降解率低的機理以及紅三葉有效成份對苜蓿青貯的影響。 收獲紅三葉和苜蓿萎蔫后在實驗室條件下進行青貯，分別于青貯后1，2，3，7，10，15，35d取樣進行各種青貯指標的測定。紅三葉由于本身發(fā)生的褐變反應(yīng)使其感官評定結(jié)果略遜

2、于苜蓿，但在整個青貯過程中紅三葉相比于苜蓿有著明顯低的pH和顯著低的NPN生成量(包括NH<,3>-N、FAA-N和Pep-N)，表明紅三葉在青貯過程中蛋白質(zhì)的水解程度要明顯低于莒蓿。 對紅三葉多酚氧化酶特性的初步研究表明，紅三葉多酚氧化酶僅作用于鄰苯酚，與對苯酚、間苯酚和一元酚則無作用，而且對不同的鄰苯酚其活性也表現(xiàn)很大差異，其中以咖啡酸作底物時活性最高。紅三葉多酚氧化酶反應(yīng)的最適pH值為6.5-7.0，最適溫度為25-30℃

3、，50℃時有較好的熱穩(wěn)定性，PVP最適添加量為鮮樣重量的10％。紅三葉PPO符合酶促反應(yīng)動力學定律，以咖啡酸為底物時的米氏常數(shù)Km值為2.1mmol L<'-1>，Vmax值為1000units min<'-1>。 五個生長三年紅三葉品種和六個生長當年紅三葉品種分別于苗期、分枝期、花期和結(jié)英期進行取樣，并將采回紅三葉植株按葉、花(莢)、莖和根不同器官進行分離，分別測定其中的多酚氧化酶活性，總酚含量和褐變性。結(jié)果顯示，不同品種不同

4、生育期不同器官中多酚氧化酶活性，總酚含量和褐變性均表現(xiàn)不同?；ㄆ诟髌鞴僦卸喾友趸富钚裕偡雍亢秃肿冃曰旧暇哂谄渌?；不同器官中多酚氧化酶活性和總酚含量以葉片中最高，花(莢)次之，再次為根，以莖中最低，而褐變性大小則依次表現(xiàn)為葉、花(莢)、莖、根；生長二年品種不同生育期多酚氧化酶活性、總酚含量和褐變性的平均值不同程度地高于生長當年品種。紅三葉多酚氧化酶活性和褐變性之間早現(xiàn)較高相關(guān)性，提示多酚氧化酶活性在紅三葉褐變反應(yīng)中可能起更

5、重要的作用。 紅三葉和苜蓿在實驗室條件下青貯后，分別于1，2，3，7，10，15，35d取樣進行蛋白水解酶活性的測定(包括羧基肽酶、酸性蛋白水解酶、氨基肽酶)。結(jié)果顯示，紅三葉和苜蓿青貯前蛋白水解酶活性相近，青貯后三種蛋白水解酶活性的變化有著明顯不同，紅三葉在青貯過程中蛋白水解酶活性降低速度顯著快于苜蓿。對兩種牧草蛋白沉淀能力的比較看出，紅三葉可以沉淀一定量的牛血清蛋白(BSA)，而苜蓿基本上不能沉淀BSA。 將紅三葉和