快中子輻射岷山紅三葉愈傷組織再生體系的建立.pdf

1、論文通過對岷山紅三葉(Trifolium pratense cv.Minshan)愈傷組織的輻射誘變和誘變后愈傷組織的細(xì)胞學(xué)觀察及再生體系的建立。得到以下結(jié)論： 1、通過配合使用酒精與次氯酸鈉進(jìn)行種子消毒發(fā)現(xiàn)：在不同次氯酸鈉有效氯濃度和滅菌時(shí)間組合下，滅菌效果明顯不同。有效氯濃度為2.0％，消毒時(shí)間為15min時(shí)消毒效果最佳，污染率控制在2.50％以內(nèi)，浸種后對種子發(fā)芽率無顯著影響。 2、岷山紅三葉種子在MS+20g/L

2、蔗糖培養(yǎng)基上存在發(fā)芽率低，發(fā)芽時(shí)間不一致的問題。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基蔗糖濃度對種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢影響顯著，當(dāng)蔗糖濃度從20g/L降到0g/L時(shí)，發(fā)芽率從16％增加到47％，且發(fā)芽時(shí)間較為一致。 3、以生長一周無菌苗的子葉和下胚軸為外植體，獲得愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為：MS+2 mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA+2％蔗糖+0.6％瓊脂，愈傷誘導(dǎo)率為100％。誘導(dǎo)出的愈傷用快中子進(jìn)行輻射，輻射劑量對岷山紅三葉的愈傷組織生長有

3、明顯的抑制作用。0.1032Gy中子吸收劑量+0.1700Gy光子吸收劑量時(shí)有一半的愈傷死亡，為最佳的誘導(dǎo)愈傷變異的吸收劑量。輻射后的岷山紅三葉愈傷出現(xiàn)了微核、小核、核出芽、雙核、多核等細(xì)胞核畸變類型。輻射后的愈傷進(jìn)行誘導(dǎo)分化，芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為：B5+0.06 mg/L，NAA+2％蔗糖+0.6％瓊脂，每瓶可以長出2～10個(gè)芽。最佳的生根培養(yǎng)基為：1/2 MS+0.05mg/LNAA+1.5％蔗糖+0.8％瓊脂，生根率達(dá)到74％。