CPG15在大鼠腦彌漫性軸索損傷中的表達及意義.pdf

1、創(chuàng)傷性腦損傷(traumaticbraininjury,TBI)是45歲以下人群中首要死亡原因。彌漫性軸索損傷(diffuseaxonalinjury,DAI)是TBI的一種常見類型，屬于神經(jīng)外科的急、重癥，治療困難，其殘、死率高。據(jù)美國昏迷資料庫統(tǒng)計：每年的昏迷患者中，DAI患者占55％。由于大多數(shù)DAI不適合手術(shù)治療，科學(xué)家們一直致力于進行神經(jīng)保護劑的治療研究。神經(jīng)營養(yǎng)因子在神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和損傷后的再生修復(fù)過程中發(fā)揮著重要作用,多年

2、來一直是研究的熱點，為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療和預(yù)防帶來了希望。候選重塑相關(guān)性基因15(candidateplasticity-relatedgene15,CPG15)是神經(jīng)營養(yǎng)因子的一個新成員,它可以被神經(jīng)活動和神經(jīng)營養(yǎng)素誘導(dǎo)。CPG15編碼的蛋白能調(diào)節(jié)神經(jīng)元突起的生長和成熟,促進神經(jīng)突起的快速生長及分支。
　　本實驗建立在大鼠頭顱側(cè)向瞬時旋轉(zhuǎn)腦DAI模型的基礎(chǔ)上，探討大鼠腦DAI中不同時間點額葉皮層組織CPG15的表達及意義，為開發(fā)

3、新型神經(jīng)保護劑提供實驗和治療依據(jù)。
　　1．大鼠DAI模型的建立
　　目的建立理想的大鼠DAI模型。方法SD大鼠隨機分成正常對照組和DAI組，使用賀曉生研制的大鼠頭顱側(cè)向瞬時旋轉(zhuǎn)裝置引致DAI。進行HE染色，觀察測評各組大鼠神經(jīng)損傷值(NSS)和測定腦組織含水量。結(jié)果①傷后大鼠NSS評分明顯升高;②DAI組傷后額葉皮層神經(jīng)元核皺縮深染、胞體增大，腫脹，核仁消失；○3DAI組傷后1d腦組織含水量明顯增高(P<0.01),隨后逐

4、漸下降，于14d降至正常水平。結(jié)論該大鼠DAI模型的成功制作為進一步實驗奠定了堅實的基礎(chǔ)。
　　2.大鼠腦DAI后CPG15表達規(guī)律研究
　　目的探討大鼠腦DAI后不同時間點額葉皮層組織CPG15的表達及意義。方法雄性SD大鼠81只，隨機分為正常對照組27只和DAI組54只，采用頭顱側(cè)向瞬時旋轉(zhuǎn)致傷裝置制作DAI模型。DAI大鼠36只按處死時間分為第1d、4d、7d、10d、14d、21d組，每組6只，進行免疫組化染色，形態(tài)

5、學(xué)觀測腦皮層CPG15的表達：細胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為CPG15陽性，反之為陰性。其余18只按處死時間分為7d、14d、21d組，每組6只，進行Western-blot方法和RT-PCR檢測，在蛋白水平及mRNA水平對CPG15進行半定量檢測。結(jié)果正常對照大鼠腦皮層組織中無CPG15表達；DAI后，CPG15在神經(jīng)元胞漿內(nèi)表達：DAI后1d,腦皮層見少量CPG15表達，DAI后4d、7d、10d，CPG15表達數(shù)量增強，14d達峰值，損