膽總管梗阻致急性膽囊炎及膽總管梗阻解除后對腫瘤壞死因子-α及膽囊組織中巨噬細胞的研究.pdf

1、目的：膽總管梗阻可以引起急性膽囊炎，因此，如何進一步認識膽總管梗阻是引起急性膽囊炎的一種原因，探索其防治措施為患者減輕痛苦、避免患者遭受不必要的膽囊切除手術(shù)是本試驗的重要目的。本研究采用家兔膽總管結(jié)扎致膽總管梗阻動物模型，觀察膽總管梗阻不同時間及梗阻解除后的家兔體溫(temperature)、白細胞(white bloodcell)、膽囊組織內(nèi)巨噬細胞(maerophage)的數(shù)量，以及血清及組織中的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)數(shù)值的

2、變化，探討膽總管梗阻引起急性膽囊炎的作用機理，為其治療提供實驗依據(jù)。 方法：選擇健康家兔72只，體重2kg-3kg，雌雄不限，隨機分為正常對照組(N組)，膽總管梗阻1天組(D1組)、3天組(D3組)、5天組(D5組)、7天組(D7組)、膽總管梗阻1天后解除組(R1組)、膽總管梗阻3天后解除組(R3組)、膽總管梗阻5天后解除組(R5組)、膽總管梗阻7天后解除組(R7組)、每組8只，解除梗阻組均解除3天后處死。所有家兔手術(shù)前一天禁食

3、，不禁水。手術(shù)時，家兔以3％戊巴比妥鈉麻醉，無菌操作，上腹正中切口，剖腹后觀察腹腔大體情況，游離膽總管下段，經(jīng)膽總管后置一外徑2mm的細硅膠管(導管內(nèi)穿引一10號絲線)，置入管及穿引線經(jīng)皮下隧道由腹壁戳孔穿出，引出處位于兩側(cè)肋緣下，距切口2cm，提起硅膠管和絲線，其緊張度以能阻止膽流為度，固定懸吊的膠管，關(guān)腹。正常對照組僅開腹游離膽總管，不置入硅膠管，梗阻解除組將置入管由腹壁抽出解除梗阻。術(shù)后禁食，自由飲水。造模后放置于代謝籠中，梗阻組

4、分別于造模1天、3天、5天、7天后處死，解除組均于膽總管解除3天后處死，處死前測量家兔體溫。各組均留取靜脈血標本，檢測白細胞數(shù)值，放射免疫法檢測血清中腫瘤壞死因子-α的數(shù)值，摘取膽囊，并取膽囊底部(保證各組所取標本部位一致)，稱重200m g，研磨成勻漿，離心后取上清液于-20℃保存，用于放射免疫法測量腫瘤壞死因子-α。取其余適量膽囊組織置于10％甲醛中固定，制作石蠟切片，采用免疫組織化學方法測量膽囊組織中的巨噬細胞的數(shù)量，所有數(shù)據(jù)結(jié)果

5、均以均數(shù)±標準差表示，各組間均數(shù)比較采用因素方差分析，p<0.05認為有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果： 白細胞：家兔血液中白細胞數(shù)值隨梗阻時間的延長逐漸升高，造模組與正常組有差異(p<0.05)，梗阻解除組與梗阻組比較有差異(p<0.05)，R1與D1比較白細胞數(shù)值下降，有差異(p<0.05)；R3與D3比較白細胞數(shù)值下降有差異(p<0.05)；R5與D5比較白細胞數(shù)值下降有差異(p<0.05)；R7與D7比較白細胞數(shù)值下降有差異

6、(p<0.05)。 體溫：家兔體溫隨梗阻時間的延長逐漸升高，造模組與正常組差異(p<0.05)，梗阻解除組與梗阻組比較有差異(p<0.05)，R1與D1比較體溫下降有差異(p<0.05)；R3與D3比較體溫下降有差異(p<0.05)；R5與D5比較體溫下降有差異(p<0.05)；R7與D7比較白細胞數(shù)值下降有差異(p<0.05)。 TNF-α：家兔梗阻組血清中和膽囊組織中腫瘤壞死因子-α也隨著梗阻時間的延長逐漸增多。各組與正常組

7、差異(p<0.05)，梗阻組組間有差異(p<0.05)，梗阻解除組與梗阻組比較有差異(p<0.05)，R1與D1比較減少有差異(p<0.05)，R3與D3比較減少有差異(p<0.05)，R5與D5比較減少有差異(p<0.05)，R7與D7比較減少有差異(p<0.05)。 巨噬細胞：家兔膽總管梗阻組膽囊內(nèi)巨噬細胞的數(shù)量的表達隨梗阻時間的延長表達也增多，各組與正常組比較增多，有差異(p<0.05)，梗阻組組間有差異(p<0.05)，

8、R1與D1比較減少有差異(p<0.05)，R3與D3比較減少有差異(p<0.05)，R5與D5比較減少有差異(p<0.05)。R7與D7比較減少有差異(p<0.05)。 結(jié)論：1膽總管梗阻能引起家兔的體溫升高，白細胞的升高及膽囊組織巨噬細胞的增多及血清和膽囊組織腫瘤壞死因子.僅的升高，引起急性膽囊炎，并隨梗阻時間的延長，膽囊炎癥越重。2膽總管梗阻的解除對可以降低膽總管梗阻家兔的體溫，降低膽囊組織的巨噬細胞及血清和膽囊組織腫瘤壞死