Ang-1重組腺病毒對(duì)糖尿病鼠腎血管新生的影響.pdf

1、背景和目的：糖尿病腎臟病變主要系局部微血管結(jié)構(gòu)和功能改變所致，其腎臟也存在著新生血管生成，這些改變很大程度上與腎臟局部血管生成調(diào)控因子的失衡相關(guān)。拮抗血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）雖有助于改善實(shí)驗(yàn)性糖尿病腎臟病變，但不利于糖尿病大血管病變的防治。Angiopoietin-1（Ang-1）是新近發(fā)現(xiàn)的具有促進(jìn)血管穩(wěn)定、降低滲漏抗內(nèi)皮細(xì)胞凋亡等生物學(xué)作用的蛋白分子。本課題采用大鼠糖尿病腎病模型，觀察腎臟血管生成相關(guān)標(biāo)志物，探討外源性給予腺病毒

2、Ang-1對(duì)糖尿病腎臟新生血管生成的影響，旨在為糖尿病血管并發(fā)癥的防治提供新的思路。 方法：構(gòu)建并鑒定高效表達(dá)Ang-1腺病毒載體，用鏈脲菌素（STZ）誘導(dǎo)的SD大鼠糖尿病腎病模型。設(shè)對(duì)照和模型兩大組，模型組又設(shè)Ang-1腺病毒、空白載體、糖尿病組三亞組。成模8周后于尾靜脈注射Ang-1腺病毒載體。分別于8、12、20、28周，檢測(cè)尿蛋白、腎功能、常規(guī)腎臟病理、RT-PCR觀察腎臟Ang-2mRNA表達(dá)、免疫熒光觀察腎臟Ang-

3、2、血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物（TM-1）和細(xì)胞增殖標(biāo)記物（Ki-67）的表達(dá)，并進(jìn)行相關(guān)分析。 結(jié)果： ①三個(gè)模型組尿蛋白、血肌酐均明顯升高（P<0．01），僅Ang-1治療組28周時(shí)尿蛋白明顯低于同時(shí)點(diǎn)糖尿病和空白載體組（P<0．01）； ②正常對(duì)照組腎組織未查測(cè)到Ang-2mRNA和蛋白表達(dá)，三個(gè)模型組于12周后腎組Ang-2mRNA和蛋白表達(dá)明顯上調(diào)，Ang-1腺病毒組上調(diào)尤其顯著（P<0．05-0．01），峰值

4、在20周，僅28周Ang-2mRNA與糖尿病和空白載體組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，Ang-2熒光主要顯示于腎小球和小管間質(zhì)； ③四組大鼠腎組織均見TM-1熒光，突出表現(xiàn)在腎小球，三個(gè)模型組TM-1熒光明顯強(qiáng)于同時(shí)點(diǎn)正常對(duì)照組（P<0．01），峰值均在20周，Ang-1腺病毒組與空白載體組和糖尿病組亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05-0．01）； ④正常對(duì)照組未發(fā)現(xiàn)Ki-67熒光，三個(gè)模型組均出現(xiàn)Ki-67熒光，峰值在20周，主要表達(dá)于腎小