多壁納米碳圈對(duì)大鼠血小板功能及凝血指標(biāo)的影響.pdf

1、目的：
　　 納米材料具有強(qiáng)烈的體積效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)、表面效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng),被日益廣泛地用于電子行業(yè),造紙業(yè)、紡織品原料、能源、化妝品等各個(gè)領(lǐng)域。在納米科技帶來(lái)輕便、經(jīng)久耐用的納米工具,清潔且廉價(jià)的能源以及智能的生物醫(yī)藥產(chǎn)品的同時(shí)[1],從事納米材料研究、生產(chǎn)、消費(fèi)以及相關(guān)納米材料廢物處理的人數(shù)將與日俱增,相關(guān)職業(yè)暴露于納米材料的機(jī)會(huì)越來(lái)越多[2]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)不同途徑接觸的納米材料都可以進(jìn)入血液循環(huán),可能對(duì)血小板及凝

2、血功能產(chǎn)生影響[3,4],因此對(duì)于納米材料潛在毒性的研究日益受到重視,其中對(duì)血液系統(tǒng)的影響也深受關(guān)注[5,6]。
　　 本課題研究的多壁納米碳圈(MWCNOs)被廣泛應(yīng)用于太陽(yáng)能電池、場(chǎng)發(fā)射、光限幅以及燃料電池電極等領(lǐng)域[7-9],具有良好的生物相容性,在生物醫(yī)學(xué)方面具有廣闊的應(yīng)用前景[7]。鑒于納米材料可由多種途徑進(jìn)入血液循環(huán),而MWCNOs對(duì)血液循環(huán)系統(tǒng)的生物安全性并不清楚。因此,本實(shí)驗(yàn)采用體外實(shí)驗(yàn)探索MWCNOs對(duì)大鼠血小

3、板聚集、血小板粘附功能的影響,并從體內(nèi)水平觀察了MWCNOs對(duì)大鼠血小板聚集、出血時(shí)間、凝血指標(biāo)以及對(duì)血栓形成的影響,以期為其在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用提供參考。
　　 方法:
　　 1.MWCNOs對(duì)血小板聚集、粘附、頸動(dòng)脈血栓形成的影響用比濁法觀察不同濃度MWCNOs對(duì)由刺激劑ADP、Thrombin、Collagen引起的血小板聚集率的影響,設(shè)定本實(shí)驗(yàn)的濃度范圍。用倒置熒光顯微鏡觀察20μg/ml MWCNOs,在不同剪切

4、力(500 s-1、1000 s-1)下對(duì)血小板粘附與膠原的影響。用化學(xué)刺激法,觀察2 mg/kg MWCNOs對(duì)25％三氯化鐵誘導(dǎo)大鼠頸動(dòng)脈血栓形成中的血流變化及其單位長(zhǎng)度血栓濕重的影響。
　　 2.多壁納米碳圈對(duì)出血時(shí)間、凝血指標(biāo)的影響尾靜脈注射不同劑量MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8 mg/kg)12 h,用斷尾法觀測(cè)大鼠出血時(shí)間。全自動(dòng)血液凝固儀檢測(cè)體內(nèi)注射MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8

5、 mg/kg)對(duì)大鼠活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)及凝血酶時(shí)間(TT)的影響。
　　 3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SPSS軟件統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果
　　 1.MWCNOs對(duì)血小板聚集、粘附、頸動(dòng)脈血栓形成的影響在不同刺激劑,二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、膠(collagen,COLL)、凝血酶(thrombin,THR)誘導(dǎo)下,隨著MWCNOs(0.2、2、20μg

6、/ml)濃度的升高,血小板聚集率降低,各刺激劑組中的高劑量組(20μg/ml)血小板聚集率與其溶劑組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;體內(nèi)注射不同劑量的MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8mg/kg)12 h,觀察由10μ MADP誘導(dǎo)下MWCNOs對(duì)血小板聚集率的影響,各劑量組的血小板聚集率(51.2％±4.5％、54.3％±7.8％和56.8％±3.0％)均低于溶劑組(64.3％±3.4％),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 在

7、低剪切力(500 s-1)作用下,20μg/ml MWCNOs抑制血小板粘附于膠原;而隨著剪切力升高(1000 s-1),抑制作用消失。
　　 不同劑量的MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8 mg/kg)對(duì)大鼠頸動(dòng)脈血栓形成中的血流及單位長(zhǎng)度血栓濕重與溶劑組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.多壁納米碳圈對(duì)出血時(shí)間、凝血指標(biāo)的影響尾靜脈注射不同濃度MWCNOs(2 mg/kg、4 mg/kg及8 mg/kg)