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文檔簡介
1、浙江大學農(nóng)業(yè)與生物技術學院碩士學位論文稻瘟病菌致病缺陷突變體Ly130的獲得及標記基因MgPRG1功能的初步研究姓名:李亞申請學位級別:碩士專業(yè):植物病理學指導教師:王政逸20080515浙江大學碩士畢業(yè)論文AbstractThericeblastdiseasecausedbythefungalpathogenMagnaporthegriseaisoneofthemostdestructivediseasesofficeToidenti
2、fythefungalpathogenicitygenesandtounderstand也eirmolecularmechanismsforpathogenicityareimportantforthecontrolofriceblastdiseaseByAgrobacteriumtumefaciensmediatedtransformation(ATMT)technique,weobtainedanonpathogenicmutant
3、Ly130andidentifiedaTDNAtaggedgeneFurthermoreweprimarilydemonstratedMgPRGlfunctionbycomplementationanalysisanddetecteditsexpressionandsubcellularlocalizationbyGFP(greenfluorescentprotein)fusionexpressionObtainingofanonpat
4、hogenicmutantLy130DNAinsertionalmutagenesisisoneofthemosteffectivemethodstoidentifypathogenicitygenesinfungalpathogenByATMTtechnique,weisolatedaLy130mutantofMgrisea,wtfichwascompletelynonpathogenictobothsusceptiblebarley
5、andricePhenotypicanalysisshowedthatthemutantWassignificantlyreducedinvegetativegrowthconidiationandunabletoformappressoriaonhydrophobicsurfacesThecolonycolorofthemutantWaslightorthanthatofthewildtypestrainGuyl1Nopcrithcc
6、iaworeobservedwhenthemutantwascrossedwithastandardtesterstrainTH3IdentificationofMgPRGlgeneToidentifythedisruptedgeneiney130,thegenomicDNAflankingTDNAWasamplifiedusinghiTAILPCRThetertiary852bpPCRproductfortherightborderW
7、aspurifiedandclonedintopGEMTeasyvectorThesequencingandBLASTresultsshowedthatTDNAinsertedinageneofMGG一14008(chromosomev)with1617bpcontaining4exonsand3intronsTheTDNAinsertsiteWaslocatedatllllbpdownstreamthestartcodoninthet
8、hirdexonThisgeneencodesapredictedproteinof467aminoacidsAfterNCBIBLASTsearchwedidnotfindanyhighhomogenoussequencestothepredictedproteinIthasrespectivesimilarityof4825%,4385%and3325%tothesequencesofXP一9639441fromNeurospora
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