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1、盾殼霉(Coniothyriumminitans)是引起作物菌核病的核盤(pán)菌(Sclerotiniasclerotirium)的重要寄生真菌,在世界范圍內(nèi)廣泛存在,是菌核病的一種重要生防菌。盾殼霉可以在pH2-12的環(huán)境下生長(zhǎng),說(shuō)明本身具有耐堿的特征。本論文主要目的在于獲得耐堿缺陷型盾殼霉,從中克隆耐堿相關(guān)的基因,為培育耐堿作物積累基因材料。實(shí)驗(yàn)自實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建好的盾殼霉T-DNA插入突變體庫(kù)篩選獲得了4個(gè)耐堿缺陷型突變體,并對(duì)它們的生物
2、學(xué)特性進(jìn)行了研究。在篩選出的突變體基礎(chǔ)上,利用Tail-PCR技術(shù)擴(kuò)增目的片段,同時(shí)對(duì)所獲得的目的片段進(jìn)行了克隆和鑒定。 實(shí)驗(yàn)共從4300個(gè)插入轉(zhuǎn)化子中篩選到ZS-lT2613、ZS-lT2979、ZS-1T3446和ZS-1T20266四個(gè)突變體,插入突變的頻率約9.3×10-4。他們?cè)趐H為9.0的PDA培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng),其中突變體ZS-1T3446在pH為8.0的PDA培養(yǎng)基上就已不能生長(zhǎng)。4個(gè)突變體與ZS-1菌株相比較,
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