應(yīng)用間充質(zhì)干細胞及納米晶膠原骨體外構(gòu)建組織工程骨的實驗研究.pdf

1、應(yīng)用組織工程技術(shù)，體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細胞，建立納米晶羥基磷灰石/膠原骨共培養(yǎng)的人工骨模型，探求細胞與納米晶膠原骨結(jié)合的最佳模式。 方法：實驗于2005～09/2006-09在江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院中心實驗室完成。全骨髓法體外培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞并擴增，記錄細胞生長曲線，應(yīng)用成骨誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)向成骨細胞表型轉(zhuǎn)化，通過細胞活性、免疫組化鑒定誘導(dǎo)培養(yǎng)的成骨細胞的細胞學(xué)特性。骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)至第三代后分為兩組：第一組骨髓間充質(zhì)干細胞先

2、與納米晶膠原基骨復(fù)合培養(yǎng)3天后再加入成骨誘導(dǎo)劑，第二組骨髓間充質(zhì)干細胞在誘導(dǎo)成骨細胞后與納米晶膠原基骨復(fù)合培養(yǎng)。兩組復(fù)合物經(jīng)體外孵育兩周后，通過掃描電鏡比較細胞在其中生長情況。 結(jié)果：倒置顯微鏡下觀察原代培養(yǎng)的骨髓細胞增殖迅速，基本都呈形態(tài)均一成纖維樣細胞，10～12天左右即可長滿，并可穩(wěn)定傳代，傳代細胞7～9天即可傳代。誘導(dǎo)培養(yǎng)后的細胞呈現(xiàn)典型的成骨細胞形態(tài)和生物學(xué)特征。構(gòu)建出骨髓間充質(zhì)干細胞與納米晶膠原基骨組織共培養(yǎng)的模型。