益生菌抑制炎癥性腸病腸道炎癥反應(yīng)的研究.pdf

1、第一部分益生菌對HT29細(xì)胞TNF-α所誘導(dǎo)的IL-8分泌的調(diào)節(jié)作用;該實驗用體外培養(yǎng)的與腸上皮細(xì)胞生物學(xué)特性相似的HT29細(xì)胞,與益生菌共培養(yǎng),用TNF-α刺激細(xì)胞以模擬腸道炎癥環(huán)境,以探討益生菌對炎癥狀態(tài)時腸上皮細(xì)胞分泌促炎細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用.方法:結(jié)腸癌上皮細(xì)胞系H29細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)后分為4組:對照組(C)、TNF-α刺激組(T)、雙歧桿菌組(B)、乳酸桿菌組(L).厭氧培養(yǎng)的雙歧桿菌和乳酸桿菌分別經(jīng)培養(yǎng)液重懸,濃度調(diào)為1×10<'8

2、> cfu/ml,并分別加入各組每孔.1h后,TNF-α(10ng/ml)加入T、B、L組的每孔中.3小時后,收集上清,ELISA法測IL-8;提取細(xì)胞核蛋白、RNA,經(jīng)Westernblotting檢測核蛋白NF-κB P65、RT-PCR檢測IL-8的表達(dá).結(jié)論:益生菌能明顯抑制促炎癥細(xì)胞因子所誘導(dǎo)的HT29細(xì)胞IL-8的分泌,益生菌調(diào)節(jié)炎癥狀態(tài)時腸上皮細(xì)胞功能的機(jī)制,可能是抑制腸上皮細(xì)胞內(nèi)NF-κ B的活化.第二部分雙歧桿菌對實驗

3、性小鼠結(jié)腸炎作用的研究;該實驗選擇了病理學(xué)特征與人類UC十分相似的小鼠急性DSS結(jié)腸炎模型,觀察補(bǔ)充益生菌對小鼠結(jié)腸炎癥程度的影響,以探討益生菌對實驗性結(jié)腸炎的治療作用和可能的機(jī)制.方法:建立小鼠急性DSS結(jié)腸炎模型,并將小鼠分為4組:正常對照組、DSS組、SASP組和雙歧桿菌組.正常對照組小鼠實驗中飲蒸餾水,其余三組中DSS組鼠飲5﹪DSS水7天,并觀察每天各組小鼠疾病活動指數(shù)(DAI).SASP組在飲DSS水同時予SASP灌胃;雙歧