麥迪霉素有關(guān)物質(zhì)及其分析方法的研究.pdf

1、[目的]設(shè)計麥迪霉素(midecamycin，MDM)、麥白霉素有關(guān)物質(zhì)檢查方法，建立高效液相色譜(HPLC)法色譜條件。分離麥迪霉素中的雜質(zhì)，對分離的雜質(zhì)進(jìn)行分析，通過精密度試驗、線性試驗等確定方法的可靠性及耐用性。確定方法之后，檢驗廠家樣品，驗證所建立方法的適用性。 [方法]在對已有文獻(xiàn)分析的基礎(chǔ)上，制訂HPLC的分析方法，并對方法進(jìn)行優(yōu)化，包括對色譜柱、流動相進(jìn)行篩選，考察柱溫對分析的影響，確定檢測波長，考察溶劑對測定的影

2、響，從而確定色譜條件。運用HPLC-MS測定其中主要組分對應(yīng)化合物準(zhǔn)分子離子峰m/z及化合物碎片m/z，以確定其組分化合物的歸屬。對制定的高效液相法的可行性進(jìn)行方法學(xué)驗證，來確定制定的方法的可行性與可靠性。同時，對國產(chǎn)麥白霉素組分進(jìn)行HPLC-MS測定，以確定幾種主要有關(guān)物質(zhì)的歸屬是否與進(jìn)口的麥迪霉素相同，并確定此方法是否適用于國產(chǎn)麥白霉素的成分分析。 [結(jié)果]通過試驗得出了最佳的HPLC條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，

3、以0.01mol·L<'-1>醋酸氨：乙腈=50:50(冰醋酸調(diào)pH為7.3)為流動相；柱溫：40℃；檢測波長：232/280nm；流速0.8～1.2mL·min<'-1>。用HPLC-MS確定了麥迪霉素組分化合物的歸屬，并且表明國產(chǎn)麥白霉素中組分的組成與進(jìn)口麥迪霉素相同。所建立的HPLC法對麥迪霉素中麥迪霉素A<,1>的最小檢出限為50ng·mL<'-1>，最小定量限為150ng·mL<'-1>；對麥迪霉素A3的最小檢出限為5.6×1

4、0<'-1>ng·mL<'-1>，最小定量限為7.0ng·mL<'-1>。此方法的精確度試驗(雜質(zhì)的峰面積以及峰高的變動系數(shù))RSD值在1.4％以下；中間精密度試驗(雜質(zhì)的峰面積和峰高的變動系數(shù))RSD值在3.0％以下。專屬性試驗中分離度驗證主成分和副產(chǎn)物B的分離度在6以上。峰的單一性(空白試驗)不含供試品的乙腈溶液注入液相色譜儀，在主成分及副產(chǎn)物的位置上沒有峰出現(xiàn)。麥迪霉素A<,1>的含量測定標(biāo)準(zhǔn)曲線：峰面積的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：C=4×

5、10<'-6>A-0.0035；峰高的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：C=1×10<'-4>A-0.0086。溶液的穩(wěn)定性可靠，回收試驗表明麥迪霉素A<,1>與麥迪霉素A<,3>回收率良好。測定樣品確定進(jìn)口的麥迪霉素各雜質(zhì)含量限度標(biāo)準(zhǔn)為：麥迪霉素B含量小于6.0％；麥迪霉素A<,2>含量小于4.0％；麥迪霉素A<,3>含量小于3.0％。確定了所建立的方法是可行的，得到的數(shù)據(jù)是可靠的。通過對麥迪霉素與國產(chǎn)的麥白霉素的比較，雖然麥迪霉素與國產(chǎn)麥白霉素的主要