急性心肌缺血誘發(fā)大鼠肺組織TNF-α的表達(dá)變化及藥物干預(yù)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支不同時(shí)點(diǎn),腫瘤壞死因子-alpha(TNF-α)在大鼠腫組織內(nèi)的表達(dá)變化及硬膜外嗎啡、羅哌卡因痛覺干預(yù)對(duì)該變化的影響,探討傷害性刺激誘發(fā)肺內(nèi)神經(jīng)源性機(jī)制的作用及痛覺干預(yù)在缺血心肌保護(hù)中的作用及機(jī)制,探討多器官損傷及保護(hù)機(jī)制,對(duì)臨床治療提供參考信息。 方法: 第一部分:TNF-α的表達(dá)變化實(shí)驗(yàn)選用雄性SD大鼠隨機(jī)分為兩組:(1) 假手術(shù)組(Sham group,S組),只開胸暴露心臟不結(jié)扎

2、冠脈;(2) 結(jié)扎冠狀動(dòng)脈組(Cororlary arteryocclusion group,CAO組),單純?cè)]冠狀動(dòng)脈左前降支。其中,Sham組和CAO組又分為四個(gè)時(shí)點(diǎn)的亞組:0.5h組、1h組、3h組、6h組,每組大鼠均為6只。1h組、3h組、6h組分別采用免疫組化(immunohistochemistry,IHC)、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(enzyme-linked immunosorberlt assay,ELISA);3h組采用原

3、位雜交(in situhybridization,ISH)、0.5h組采用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(real timereverse trancriptatjon polymerase chain reaction,Real Time RT-PCR)從蛋白和mRNA水平觀察并分析結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈不同時(shí)點(diǎn)肺組織內(nèi)TNF-α的表達(dá)變化情況。 第二部分:硬膜外預(yù)先給藥后TNF-α的表達(dá)變化的研究采用雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組:(1

4、)假手術(shù)組(Sham group,S組):(2)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈組(Coronary artery occlusiongroup,CAO組);(3) 硬膜外嗎啡預(yù)處理組(Epidural Morphine group,E-M組),在結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前 15min經(jīng)硬膜外給予嗎啡60μg.kg-1。(4) 硬膜外羅哌卡因預(yù)處理組(Epidural Ropivacaine group,R-M組),在結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前15min經(jīng)硬膜外給予1%羅哌卡

5、因15μl。同第一部分分別采用IHC、ELISA和Real Time RT-PCR從蛋白和mRNA水平對(duì)比分析藥物的干預(yù)效應(yīng)。 結(jié)果:(1) 結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支后大鼠腫組織內(nèi)TNF-α水平較S組顯著升高(P<0.01),肺組織內(nèi)TNF-α的表達(dá)在CA03h達(dá)高峰(P<0.01);(2) 硬膜外嗎啡預(yù)處理組TNF-α水平明顯低于CAO組(P<0.01)(3) 硬膜外羅哌卡兇預(yù)處理組TNF-α水平明顯低于CAO組(P<0.01)結(jié)

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