構樹總黃酮對表皮細胞防護作用研究.pdf

1、該研究的目的是構樹葉中提取天然成分,并研究其對表皮細胞的防護作用.首先,收集構樹葉和提取構樹總黃酮(total flzvonoids of Broussonetiapapyrifera,TFBP).取粉碎的構樹葉干粉1000g,75％乙醇冷浸提取24h,收集浸液,藥渣再用乙醇抽提,混合浸取液,用石油醚除雜質后,上聚酰胺柱,先用蒸餾水洗脫至無色,再用2000m195％乙醇洗脫,洗脫液經(jīng)65℃水浴濃縮得到褐黃色固體2.008g,定性鑒定<'

2、[5]>和黃酮類物質的一般性質相符.蘆丁為標準品,分光光度法測定黃酮類物質的含量為7.91％.加標回收法測得平均回收率為99.53％,并通過抗油脂氧化反應實驗初步判定提取物具有抗氧化性.其次,用波長為365nm,劑量1.38J/cm<'2>的紫外線照射,觀察細胞損傷現(xiàn)象:多數(shù)細胞的胞體萎縮、胞漿暗、細胞變小、變圓、角質化增強、細胞脫落.初步證實紫外線對表皮細胞有損傷作用.最后,通過酶消化表皮細胞,并分別給予不同劑量紫外線、鉛、砷,不同劑

3、量的構樹總黃酮TFBP處理細胞,通過噻唑藍(MTT)染色法檢測細胞活性、細胞裂解液中MDA含量、SOD和GSH-Px活力變化,以判斷構樹總黃酮是否對表皮細胞有保護作用.綜上所述,在該實驗條件下,從構樹葉中能夠提取得到構樹總黃酮,含量為0.273g/kg.大劑量的紫外線、鉛、砷分別作用表皮細胞,可以使細胞的活性降低,對細胞有損害作用.當添加100~200mg/L的構樹總黃酮TFBP后,細胞活性升高,MDA含量明顯下降,SOD和GSH-Px