缺氧相關(guān)基因單核苷酸多態(tài)性與急性高原病易感性的研究.pdf

1、背景和目的：急性高原?。ˋMS）嚴(yán)重影響我國(guó)青藏高原移居人群的健康，目前尚無有效的防治對(duì)策。高原習(xí)服和適應(yīng)過程中個(gè)體差異的存在提示AMS的發(fā)生可能是環(huán)境和遺傳因素共同作用的結(jié)果。因此推測(cè)遺傳因素可能與AMS易感性存在關(guān)聯(lián)。本研究通過對(duì)AMS易感人群與不易感人群缺氧相關(guān)基因的單核苷酸多態(tài)性（SNP）進(jìn)行對(duì)比研究，旨在探索SNP與AMS易感者之間的關(guān)系.
　　 方法：以由內(nèi)地空運(yùn)急進(jìn)海拔3658米高原（拉薩）的漢族入伍新兵為研究對(duì)象

2、，癥狀評(píng)分法調(diào)查AMS發(fā)病率，測(cè)定SpO2、采集外周靜脈血并提取DNA，ELISA測(cè)定40名AMS患者和40名未發(fā)病人群的血漿VEGF濃度。采用病例對(duì)照研究的方法，從AMS患者中隨機(jī)選取200人作為病例組，從未發(fā)病人群中選取匹配的200人作為對(duì)照組。以引物延伸結(jié)合基質(zhì)輔助激光解吸附離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)缺氧相關(guān)基因不同SNP位點(diǎn)的多態(tài)性，這些基因包括血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、缺氧誘導(dǎo)因子1（HIF1A）、谷胱甘肽過氧化物酶M3（

3、GSTM3），谷胱甘肽過氧化物酶P1（GSTP1）、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（NOS2）、內(nèi)皮型一氧化氮合酶（NOS3）、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）和熱休克蛋白A4（HSPA4）基因。統(tǒng)計(jì)遺傳學(xué)軟件分析其與AMS的關(guān)聯(lián)性。
　　 結(jié)果：入伍新兵急進(jìn)高原（拉薩）后AMS發(fā)病率為35.68％。AMS組SpO2從505米處的98.02±1.69％降至3，658 m處的85.16±5.42％（P<0.01）。對(duì)照組SpO2從505米處的98.

4、02±1.40％降至3658米處的86.30±4.63％（P<0.01）。在海拔3658米高原，與對(duì)照組比較，AMS組氧飽和度明顯下降（P<0.05）。與基線水平比較，海拔3658米高原對(duì)照組血漿VEGF濃度從41.03±37.37pg/ml降至16.98±11.61pg/ml（P<0.01），AMS組從79.276±27.48 pg/ml降至55.58±20.19 pg/ml（P<0.01）.不論在平原或高原，AMS組血漿VEGF濃度

5、均顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。除HSPA4基因的rs35853823位點(diǎn)外，AMS組與對(duì)照組的13個(gè)SNP位點(diǎn)均存在SNP，且處于Hardy-Weinberg平衡。VEGF基因rs3025039位點(diǎn)中等位基因T與AMS存在關(guān)聯(lián)（P=0.01，比值比（OR），0.62，95％可信區(qū)間（CI）0.43-0.90）。該位點(diǎn)基因型CC、CT和TT頻率在AMS組與對(duì)照組間存在顯著性差異（P=0.0297），等位基因T為加性模式時(shí)，CT基因型與

6、AMS存在關(guān)聯(lián)（P=0.010，OR，0.56，95％CI 0.36～0.87）；等位基因T為顯性模式時(shí)，CT+TT基因型與AMS存在關(guān)聯(lián)（P=0.008，OR，0.56，95％CI 0.37～0.86）.VEGF基因rs3025030位點(diǎn)等位基因C與AMS存在關(guān)聯(lián)（P=0.019，OR，0.64，95％CI 0.44-0.93）。該位點(diǎn)等位基因C為顯性模式時(shí)，CC+CG與AMS顯著相關(guān)（P：0.0184，OR，1.66，95％CI1.

7、10-2.45）。NOS2基因rs1137933位點(diǎn)等位基因T為加性模式時(shí)，TT基因型與AMS顯著相關(guān)（P=0.049，OR，3.04，95％CI 0.96～9.68）.該位點(diǎn)等位基因T為隱性模式時(shí)，TT基因型與AMS存在關(guān)聯(lián)（P=0.04，OR，3.13，95％CI0.99.9.87）。ACE基因rs4309位點(diǎn)等位基因C為隱性模式時(shí)，CC基因型與AMS存在關(guān)聯(lián)（P=0.049，OR，1.83，95％CI 1.00-3.34）.NOS

8、2基因的rs2297518位點(diǎn)，HIF1A基因的rs8005745、rs2301108和rs10873142位點(diǎn)，GSTP1的rs1695位點(diǎn)，GSTM3的rs7483位點(diǎn)，NOS3的rs1799983、rs3918188和rs7830位點(diǎn)以及HSPA4基因的rs35853823位點(diǎn)等位基因頻率和基因型在AMS組和對(duì)照組間均不存在顯著性差異（P>0.05）。在單體型水平，由VEGFA基因rs3025030（G/C）和rS3025039（

9、C/T）組成的單體型GC/CT頻率在AMS組與對(duì)照組間存在顯著性差異（P=0.029）。AMS組與對(duì)照組間由HIF1A基因SNP位點(diǎn)rs8005745、rs2301108和rs10873142構(gòu)成的單體型AGT/TAC/AGC頻率分布沒有顯著性差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：1、入伍新兵急進(jìn)海拔3658米高原（拉薩）后AMS發(fā)病率為35.68％。2、高原低氧條件下人體SpO2和血漿VEGF蛋白濃度明顯下降，平原和高原條件下A

10、MS患者血漿VEGF濃度均明顯高于未發(fā)病人群。3、中國(guó)漢族人群VEGF基因的rs3025039和rs3025030位點(diǎn)與AMS發(fā)病相關(guān)聯(lián)，等位基因T和C是AMS發(fā)生的保護(hù)因素；4、NOS2基因的rs1137933位點(diǎn)純合基因型TT和ACE基因的rs4309位點(diǎn)CC基因型與AMS存在關(guān)聯(lián)。攜帶這2種基因型的個(gè)體發(fā)生AMS的風(fēng)險(xiǎn)增加。5、NOS2基因的rs2297518位點(diǎn)，HIF1A基因的rs8005745、rs2301108和rs108