結(jié)締組織生長因子在紅色閃爍光誘導(dǎo)豚鼠近視眼鞏膜內(nèi)的表達.pdf

1、目的：
　　 研究在紅色閃爍光誘導(dǎo)豚鼠近視眼鞏膜中結(jié)締組織生長因子(connectivetissue growth factor,CTGF)的表達,探討CTGF在近視發(fā)展過程中的作用和機制。
　　 方法
　　 選擇健康、出生15～20天的豚鼠30只,檢影驗光雙眼屈光度在(+2.50～+3.50)D之間,雌雄兼顧。隨機分為3組,每組10只。Ⅰ組用明2s、暗2s的紅色閃爍光照射,放在完全密閉的紙箱中飼養(yǎng);Ⅱ組用正常自

2、然光照射,放在四周密閉而上方開放的紙箱中飼養(yǎng);Ⅲ組用正常自然光照射,放在視野開闊的籠中飼養(yǎng)。分別在實驗前、實驗8周時用散瞳檢影驗光法測量3組動物的屈光度,用A超測量眼軸長度。經(jīng)檢影驗光及測定眼軸長度后,用過量麻醉法(3％戊巴比妥鈉)處死動物,摘除眼球,去除結(jié)膜、筋膜、眼外肌、脂肪、視神經(jīng),然后用剪刀沿赤道部環(huán)形剪開眼球壁,去除眼前節(jié)組織與玻璃體,用無齒鑷剝離視網(wǎng)膜,用小剪刀剝離并刮除脈絡(luò)膜,取后極部鞏膜用免疫組織化學(xué)法和western-

3、blot法檢測豚鼠鞏膜中CTGF的表達。
　　 結(jié)果
　　 1、豚鼠屈光度和眼軸長度的變化:實驗前,Ⅰ組屈光度為(+3.04±0.65)D,眼軸長度為(7.50±0.29)mm,Ⅱ組屈光度為(+3.10±0.52)D,眼軸長度為(7.49±0.19)mm,Ⅲ組屈光度為(+2.85±0.89)D,眼軸長度為(7.47±0.36)mm,統(tǒng)計學(xué)分析,3組間屈光度和眼軸長度無顯著性差異(P＞0.05)。實驗8周后,Ⅰ組屈光度為(

4、-8.25±0.78)D,眼軸長度為(8.82±0.16)mm,Ⅱ組屈光度為(+0.75±0.56)D,眼軸長度為(7.90±0.30)mm,Ⅲ組屈光度為(+1.72±0.65)D,眼軸長度為(7.78±0.54)mm,統(tǒng)計學(xué)分析,Ⅰ、Ⅱ組誘導(dǎo)出近視,且伴有眼軸的增長,兩組間屈光度和眼軸長度均有顯著性差異(P＜0.01)。Ⅱ組與Ⅲ組相比兩組間屈光度和眼軸長度均有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 2、免疫組織化學(xué)法檢測豚鼠近視眼

5、鞏膜中CTGF蛋白的表達:實驗8周后3組后極部鞏膜組織中免疫組化學(xué)染色實驗均能檢測到CTGF蛋白的表達,陽性表達率分別為(40.21±0.65)％、(15.04±0.59)％、(10.36±0.78)％,Ⅰ組CTGF陽性表達率明顯高于Ⅱ、Ⅲ組(P＜0.01),Ⅱ組明顯高于Ⅲ組(P＜0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3、Western-blot檢測CTGF在鞏膜內(nèi)表達的變化:經(jīng)ECL系統(tǒng)分析,3組CTGF蛋白與內(nèi)對照β-act