ER,PR在同一乳腺癌患者中癌組織,癌旁及癌旁遠(yuǎn)端正常組織中表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　 檢測(cè)雌激素受體(estrogen receptor,ER),孕激素受體(Progesterone receptor,PR),在乳腺癌,癌旁及遠(yuǎn)端正常組織中的表達(dá),以解釋可能存在的內(nèi)分泌治療抵抗的原因,以及同一患者三個(gè)部位陽性表達(dá)的不同所引起的生物學(xué)行為的差異。
　　 方法：
　　 臨床病理資料:收集中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2010年3月-2010年7月手術(shù)切除乳腺癌標(biāo)本55例,入組標(biāo)準(zhǔn)為所有病人均為

2、女性患者,患者術(shù)前均未行任何放、化療及內(nèi)分泌治療。每例患者分別取癌組織,癌旁2cm處組織及癌旁5cm以外組織(病理均確認(rèn)為正常乳腺組織)。
　　 免疫組化染色及判定方法:采用PV9000免疫組化二步法檢測(cè)乳腺癌,癌旁及癌旁遠(yuǎn)端正常組織中ER,PR的表達(dá)。兔抗人雌激素受體ER單克隆抗體(工作濃度為1:75),兔抗人孕激素PR單克隆抗體(工作濃度為1:75)均購自福州邁新生物公司。PV9000免疫組化檢測(cè)試劑盒和氨基聯(lián)苯胺(DAB)

3、顯色試劑盒購自北京中杉生物有限公司。所有蠟塊切片后,經(jīng)60℃烘干、脫蠟、水化,雙氧水封閉內(nèi)源性過氧化酶,高溫高壓處理,檸檬酸修復(fù)液(pH6.0)高溫高壓修復(fù)抗原,冷卻后,加入過氧化物酶阻斷劑A10min,加入一抗4℃過夜,二抗C37攝氏度30min,加入D試劑37攝氏度30min,最后DAB顯色,蘇木精復(fù)染,脫水封固,光鏡下觀察,PBS替代一抗做陰性對(duì)照。結(jié)果判定方法:ER,PR蛋白反應(yīng)陽性為棕黃色顆粒定位于細(xì)胞核。每個(gè)病例由兩位觀察者

4、采用盲法隨機(jī)選擇5個(gè)高倍視野,計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞,染色強(qiáng)度(A)以陽性細(xì)胞呈色反應(yīng)為準(zhǔn):無特異性著色為0分,淺棕色為1分,棕黃色為2分,深棕色為3分;染色的陽性細(xì)胞所占比例(B)按下列標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定記分:陰性細(xì)胞或弱陽性細(xì)胞＜5％為0分,陽性細(xì)胞占5～25％為1分,陽性細(xì)胞占26％～50％為2分,陽性細(xì)胞51％～75％為3分,陽性細(xì)胞＞75％為4分。兩種評(píng)分相乘(AxB),將結(jié)果分為:0分為陰性(-);1～4分為弱陽性(+);5～8分為中度陽性

5、(++);9～12分為強(qiáng)陽性(+++)。
　　 結(jié)果：
　　 臨床上將ER,PR統(tǒng)稱為激素受體(hormone receptor,HR),本研究中同一患者癌組織,癌旁組織及遠(yuǎn)端正常組織HR均陽性的患者例數(shù)最多,為17個(gè),占30.9％,癌和癌旁陽性,遠(yuǎn)端正常陰性的的患者為12個(gè),占21.8％;正常到癌組織的由陰轉(zhuǎn)陽患者總數(shù)是一直都是陰性的兩倍(10:5);另外由正常到癌時(shí)的由陽轉(zhuǎn)陰的患者也有9個(gè),占16.4％
　　

6、 因?yàn)榛颊呃龜?shù)較少,所以我們進(jìn)一步將癌旁組織及癌旁遠(yuǎn)端正常組織作為一個(gè)整體統(tǒng)稱正常組織,認(rèn)為它們其中只要有一個(gè)陽性即為正常組織陽性。分析發(fā)現(xiàn)ER癌組織陽性患者中其正常組織也同時(shí)陽性(28/43,65％)的患者所占比例與ER陰性患者而其正常組織陽性(7/12,58％)的患者所占比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P＜0.05;相似地,PR癌組織陽性患者中其正常組織也同時(shí)陽性(30/42,71％)的患者所占比例與PR陰性患者而其正常組織陽性(9/13,69％

7、)的患者所占比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P＜0.05;HR同PR。
　　 最后,我們根據(jù)同一個(gè)患者中ER或PR或HR在癌組織和正常組織中的表達(dá)情況將所有患者分為四組:①癌及正常組織均陽性表達(dá);②癌表達(dá)陽性,正常陰性;③癌表達(dá)陰性,正常組織陽性;④癌及正常組織均表達(dá)陰性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)ER:四組患者年齡上無差異,P＜0.05;③、④組在組織學(xué)分級(jí),TNM分期、Her-2陽性表達(dá),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上均高于①組,P＜0.05;④組在Her-2陽性表達(dá)上高于

8、②組,P＜0.05;。PR:四組患者年齡上無差異,P＜0.05;③、④組在TNM分期、Her-2表達(dá),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上均高于①組,P＜0.05;③組在組織學(xué)分級(jí)上高于①組,P＜0.05。
　　 但是臨床上最重要的是患者激素受體HR,因?yàn)槲覀冋J(rèn)為患者不論癌組織或正常組織,只要ER或PR陽性都看作HR陽性。結(jié)果發(fā)現(xiàn):③,④組在Her-2陽性表達(dá),TNM分期,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上顯著高于①組,P＜0.05:另外④組在年齡上顯著低于①組,P＜0.0

9、5,在組織學(xué)分級(jí)上高于①組;④組在TNM分期上顯著高于②組,P＜0.05。
　　 結(jié)論：
　　 同一患者癌組織,癌旁組織及遠(yuǎn)端正常組織HR均陽性的患者例數(shù)最多,為17個(gè),占30.9％,癌和癌旁陽性,遠(yuǎn)端正常陰性的的患者為12個(gè),占21.8％,提示患者如果在癌和癌旁都是陽性,那么它在遠(yuǎn)端正常組織中陽性的可能性也比較大,同時(shí)提示受激素作用的患者更容易發(fā)生癌變;正常到癌組織的由陰轉(zhuǎn)陽患者總數(shù)是一直都是陰性的兩倍(10:5),提

10、示在癌變是較易受激素的影響。另外由正常到癌時(shí)的由陽轉(zhuǎn)陰的患者也有9個(gè),占16.4％,提示在癌激素受體是陰性的患者,可能是有陽性轉(zhuǎn)變而來的。
　　 由于樣本例數(shù)較少,我們將癌旁組織及癌旁遠(yuǎn)端正常組織作為一個(gè)整體統(tǒng)稱正常組織后,發(fā)現(xiàn)ER或PR或HR癌組織陽性患者中其正常組織也同時(shí)陽性的患者所占比例與其對(duì)應(yīng)的陰性患者而其正常組織陽性的患者所占比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,提示在由正常組織轉(zhuǎn)變?yōu)榘┑倪^程中,其受體變化時(shí)不確定的。也就是說同一患者中其

11、癌組織的受體表達(dá)情況并不能反映其正常組織的受體狀態(tài)。
　　 ER癌組織陽性患者中其正常組織也同時(shí)陽性的患者所占比例與ER陰性患者而其正常組織陽性的患者所占比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,提示ER癌組織陽性患者其正常組織也同時(shí)陽性的可能性并不高于ER癌組織陰性患者;同理,PR也是:也就是說同一患者中其癌組織的受體表達(dá)情況并不能反映其正常組織的受體狀態(tài)。
　　 進(jìn)一步的分組分析提示ER或PR或HR同時(shí)陽性表達(dá)組其生物學(xué)行為可能優(yōu)于ER或P