酵母培養(yǎng)物破壁條件的優(yōu)化及其對(duì)底物發(fā)酵的影響.pdf

1、本試驗(yàn)研究了充分破壁后的液態(tài)酵母培養(yǎng)物對(duì)瘤胃發(fā)酵和纖維消化的影響。 試驗(yàn)一為酶法和超聲波法破壁條件的優(yōu)化試驗(yàn)，采用L9(3<'4>)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，酶法破壁設(shè)定酶量、溫度和酶解時(shí)間三個(gè)影響因素，超聲波法設(shè)定功率、變幅桿末端直徑和超聲時(shí)間三個(gè)影響因素，每個(gè)因素設(shè)定三個(gè)水平，然后測(cè)定破壁率，從中初步選出較好的破壁條件。酵母細(xì)胞破壁后測(cè)定維生素B<,2>和維生素B<,6>的含量，之后根據(jù)破壁后維生素B<,2>和維生素B<,6>的保存程度

2、來(lái)最終確定最佳的破壁條件。試驗(yàn)二為破壁的液態(tài)培養(yǎng)物對(duì)體外模擬瘤胃發(fā)酵影響的研究。試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理組，分別為：(1)添加自溶破壁液態(tài)培養(yǎng)物；(2)超聲波破壁液態(tài)培養(yǎng)物；(3)溶菌酶破壁液態(tài)培養(yǎng)物：(4)蝸牛酶破壁液態(tài)培養(yǎng)物的試驗(yàn)組；(5)添加培養(yǎng)底料的對(duì)照組。在發(fā)酵0h、2h、4h、6h和8h后，測(cè)定其中羧甲基纖維素酶活力、氨態(tài)氮濃度、pH和產(chǎn)氣量。試驗(yàn)三為酶法和超聲波法最佳破壁條件下破壁的液態(tài)培養(yǎng)物對(duì)羊草纖維降解率影響的研究。分組情況與模

3、擬瘤胃發(fā)酵試驗(yàn)相同，在發(fā)酵6h、12h、24h、36h、48h和60h后，測(cè)定干物質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的降解率。 具體試驗(yàn)結(jié)果如下： 細(xì)胞破壁條件的優(yōu)化：根據(jù)破壁率和破壁后維生素的含量，篩選出的酶法最佳破壁條件分別為：添加溶菌酶破壁時(shí)，選用加酶量12mg/ml，酶作用時(shí)間7h，酶作用溫度50℃的破壁條件；添加蝸牛酶時(shí)選用加酶量12mg/ml，酶作用時(shí)間7h，酶作用溫度35℃的破壁條件；未冰浴時(shí)，超聲波法的最佳破

4、壁條件為：功率400W，變幅桿末端直徑15mm，超聲時(shí)間10min。酶法破壁液態(tài)培養(yǎng)物中的維生素B<,2>和B<,6>含量比超聲波破壁液態(tài)培養(yǎng)物中的維生素B<,2>和B<,6>含量含量高(P<0.05)。 酶法和超聲波法破壁液態(tài)培養(yǎng)物對(duì)體外模擬瘤胃發(fā)酵的影響：在發(fā)酵后2～8h，酶法破壁的液態(tài)培養(yǎng)物可以顯著提高羧甲基纖維素酶活力(P<0.05)。與對(duì)照組相比，在6小時(shí)和8小時(shí)，添加酵母培養(yǎng)物的各試驗(yàn)組均有降低氨濃度的作用，其中酶法

5、破壁的液態(tài)培養(yǎng)物的氨濃度顯著低于自溶破壁和超聲波破壁液態(tài)培養(yǎng)物的氨濃度(P<0.05)。與對(duì)照組相比，添加酵母培養(yǎng)物的各試驗(yàn)組都有穩(wěn)定pH值的趨勢(shì)，但差異不顯著(P>0.05)。添加酵母培養(yǎng)物的各試驗(yàn)組顯著的提高了總產(chǎn)氣量(P<0.05)，顯著的降低了甲烷的產(chǎn)生量(P<0.05)。 酶法和超聲波法破壁液態(tài)培養(yǎng)物對(duì)羊草纖維降解率的影響：各組間DM降解率沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。在6～24h，各組間NDF降解率顯著不差異(P>0

6、.05)；酶法破壁的液態(tài)培養(yǎng)物(36h，48h，60h)、自溶破壁液態(tài)培養(yǎng)物(36h，60h)、超聲波破壁液態(tài)培養(yǎng)物(60h)分別在上述幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)提高了NDF降解率，與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)。酶法破壁的液態(tài)培養(yǎng)物(12h，24h，48h，60h)、自溶破壁液態(tài)培養(yǎng)物(60h)、超聲波破壁液態(tài)培養(yǎng)物(48h，60h)分別在上述幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)提高了ADF降解率，與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，其它時(shí)間點(diǎn)和其它酵母培養(yǎng)物的ADF