黨參總皂苷的提取純化及對大鼠腎缺血再灌注損傷的保護作用研究.pdf

1、目的:黨參總皂苷(total saponins of Codonopsis,TSC)是黨參中含有的一類重要生物活性物質,研究表明,黨參總皂苷能防治實驗性高脂血癥,還具有抗腫瘤、抗菌等作用,具有很高的藥用價值和開發(fā)前景。目前,國內對黨參總皂苷的提取分離純化工藝未見任何系統(tǒng)的報道。以黨參為原料,對其提取、純化工藝進行研究,探討‘TSC對大鼠腎缺血再灌注損傷的保護作用,為黨參資源的進一步開發(fā)應用提供依據。
　　 方法:建立香草醛.高氯

2、酸顯色反應測定TSC的分光光度法；采用超聲提取法與傳統(tǒng)的冷浸法、加熱回流提取法進行比較,以TSC的得率為指標,按L9(34)進行正交實驗,對超聲提取工藝進行優(yōu)化；通過比較四種大孔吸附樹脂(macroporous adsorption resin,MAR)的靜態(tài)吸附量和解吸率,篩選出XAD-16型MAR.,以TSC的含量為指標,考察XAD-16樹脂分離、純化TSC的工藝條件；采用結晶法對TSC進一步純化；通過測定三種模型組中腎組織的超氧化

3、物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)含量及腎小管上皮細胞凋亡指數(apoptosis index,AI),探討TSC對大鼠腎缺血再灌注損傷的保護作用。
　　 結果:采用香草醛-高氯酸比色法,測定波長為554nm,以人參皂苷Re為對照品,在3～200μg范圍內對照品的量與吸光值呈良好的線性關系,相關系數為0.9996；方法回收率為98.25％,RS

4、D為1.02％。實驗結果表明超聲提取最佳條件為:甲醇提取,料液比1:20,超聲時間30min,超聲次數3次,TSC的平均得率為6.60％。XAD-16型MAR對純化TSC的動態(tài)吸附參數:上柱藥液濃度5.00mg/mL、吸附流速2BV/h、徑高比1:5、上樣體積32mL；動態(tài)洗脫參數:先用5BV水洗糖類等水溶性雜質,再用5BV10％的甲醇洗滌,最后選用水飽和正丁醇進行洗脫,收集水飽和正丁醇洗脫部分；純化后總皂苷含量明顯比純化前總皂苷含量高