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1、目的:研究慢性乙型肝炎患者外周血樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)的功能差異,為探討慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。
方法:選取HBeAg陽(yáng)性和HBeAg陰性的慢性乙型肝炎患者各10例作為實(shí)驗(yàn)組,同時(shí)選取健康體檢者10例作為對(duì)照,均在無(wú)菌條件下抽取外周血30ml,肝素抗凝,通過淋巴分離液密度梯度離心法分離單個(gè)核細(xì)胞,予粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte-macrophagecolony-s
2、timulating factor,GM-CSF)+白介素-4(interleukin-4,IL-4)誘導(dǎo)為成熟的DC,并于倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞誘導(dǎo)過程中的形態(tài)改變。ELISA法檢測(cè)DC分泌IL-12的水平;RT-PCR檢查IL-12mRNA;流式細(xì)胞儀檢測(cè)樹突狀細(xì)胞CD86、CD14的表型。
結(jié)果:各組誘導(dǎo)的DC均呈典型的樹突狀形態(tài),單個(gè)核細(xì)胞表面的特征性CD14表達(dá)水平低。慢性乙型肝炎患者IL-12 mRNA、CD86水平
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