高同型半胱氨酸血癥與先天性心臟病及Cx43mRNA表達的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過建立大鼠高同型半胱氨酸血癥(Hyperhomocysteinemia，Hhe)模型，觀察胎鼠心臟畸形情況，探討同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)、間隙連接蛋白43(Connexin43，Cx43)mRNA表達及葉酸(Folic Acid，F(xiàn)A)與先天性心臟病(Congenital heart defect，CUD)的關(guān)系，從心臟發(fā)育的分子學(xué)角度探討CHD發(fā)生的病因。 方法：40RS-D孕鼠隨機分為四組：低

2、劑量Hcy建模組(1％Hcy，A組)、高劑量Hcy建模組(2％Hcy，B組)、FA干預(yù)組(C組)及生理鹽水對照組(D組)，每組各10只。大鼠妊娠第7天始腹腔注射不同劑量的Hcy：A組1％Hcy100mg/(kg.d)、B組2％Hcy200mg/(Kg.d)、C組2％Hcy200mg/(Kg.d)、D組生理鹽水同體積注射，C組自確定妊娠起FA按4mg/(Kg.d)給藥。妊娠第20天剖宮取胎，體視顯微鏡觀察胎鼠心臟畸形情況，高效液相色譜-電

3、化學(xué)法檢測孕鼠血漿Hcy濃度(妊娠前和妊娠20天)。選取各組部分胎鼠心肌組織(A、B、C三組CHD胎鼠心臟及非CHD胎鼠心臟分別各取11例、15例，D組非CHD胎鼠心臟15例)提取RNA，應(yīng)用realtime PCR檢測Cx43mRNA在胎鼠心臟的表達情況。 結(jié)果: 1.A、B兩組妊娠前(11.94±0.39μmol/L，11.81±0.88μmol/L)與妊娠第20天(20.90±1.08μmol/L，30.47±1.

4、11μmol/L)孕鼠血漿Hcy濃度比較，p<0.01，妊娠第20天血漿Hcy濃度高于妊娠前的，大鼠Hhe模型建立成功；妊娠20天四組孕鼠血漿Hcy濃度比較，B組(11.81±0.88μmol/L)>A組(20.90±1.08μmol/L)>D組10.98±0.77μmol/L)，B組(30.47±1.11μmol/L)>C組(21.92±1.23μmol/L)>D組(10.98±0.77μmol/L)，P值均<0.01。 2.

5、四組心臟畸形率分別為：9.57％、14.13％、9.73％及0.75％，A與B及B與C比較，p>0.05；A、B、C分別與D比較，P值均<0.01，外源性Hcy可引起胎鼠心臟畸形。 3.Cx43mRNA在四組胎鼠心臟表達的比較：組內(nèi)及組間比較在CHD胎鼠心臟及非CHD胎鼠心臟的表達，P值均<0.01，Cx43mRNA在CHD胎鼠心臟中的表達高于非CHD胎鼠。三組CHD胎鼠心臟中的表達比較：B組>A組，B組>C組，p值均<0.01