八種中草藥中抗腫瘤活性物質(zhì)體外篩選及其機(jī)制初探.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了抗腫瘤活性物質(zhì)體外篩選及其作用機(jī)制的研究.首先用MMT法對(duì)蕓香草、半邊蓮、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪術(shù)等8種中草藥作用于癌細(xì)胞進(jìn)行篩選.結(jié)果表明,濃度為1.0-1-5mg/ml的甘草乙醇浸提液(ESCG)、莪術(shù)乙醇浸提液(ESCC)和柴胡乙醇浸提液(ESCB)對(duì)體外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞SMMC-7721和肺癌細(xì)胞SPC-A1有較強(qiáng)的抑制增殖作用.在一定范圍內(nèi),抑制作用隨著濃度的加大而加強(qiáng),并且隨著時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞成活率呈現(xiàn)

2、下降趨勢(shì).在濃度1.0-1.5mg/ml時(shí),6-12小時(shí)是ESCB和ESCG對(duì)腫瘤細(xì)胞的最佳抑制時(shí)間,而ESCC最佳作用時(shí)間則是在12-24小時(shí).曲線抑制率的計(jì)算還表明:活性物質(zhì)對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用,更大地依賴于活性物質(zhì)本身,而不是腫瘤細(xì)胞株.將1.5mg/ml ESCG、ESCC和ESCB分別作用于癌細(xì)胞,光鏡下72小時(shí)內(nèi)可見(jiàn)具"凋亡"形態(tài)的細(xì)胞:胞質(zhì)濃縮,膜起小泡,出現(xiàn)凋亡小體,膜仍具完整性.用Hoechst33342及PI熒光染料對(duì)活

3、性物質(zhì)作用下的細(xì)胞進(jìn)行聯(lián)合染色,可以看到,不僅有發(fā)出紅色熒光的壞死細(xì)胞和發(fā)出藍(lán)色熒光的正常細(xì)胞,還有發(fā)出草藍(lán)色熒光的凋亡細(xì)胞.提取細(xì)胞DNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,出現(xiàn)明顯的"DNA ladder",表明一定濃度的ESCG、ESCC和ESCB在體外能誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞SPC-A1和肝癌細(xì)胞SMMC-7721凋亡.凋亡曲線證明了腫瘤細(xì)胞的凋亡率隨著活性物質(zhì)濃度的增大而增大.以上結(jié)果表明,在體外ESCG、ESCC和ESCB對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721