膠原-肝素層層自組裝修飾羥基磷灰石多孔義眼座血管化研究.pdf

1、研究背景:
　　眼球摘除術(shù)后，選擇義眼座植入術(shù)彌補(bǔ)眶內(nèi)容物缺失并配戴合適的義眼片，是修復(fù)眼球缺失、恢復(fù)面部外觀較為理想的治療方案。眼座植入眼眶后新生血管及纖維結(jié)締組織沿微孔緩慢從外周向中央生長(zhǎng)，此過(guò)程即為眼座血管化;若血管化未能及時(shí)進(jìn)行，將導(dǎo)致眼座抗感染和抗排斥的能力降低，同時(shí)生物學(xué)性能大大下降。因此，改善眼座材料的理化性能，顯著提高植入物的生物相容性和生物活性，降低眼座植入術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生率，是提高患者生存質(zhì)量的有效途徑。

2、>　　目的:
　　研究利用層層自組裝技術(shù)制備膠原(COL)/肝素(HEP)多層膜復(fù)合羥基磷灰石(HA)多孔眼座的可行性，以提高眼座材料的生物相容性和血管化性能，并體外實(shí)驗(yàn)表征材料的生物學(xué)性能。以期為進(jìn)一步體內(nèi)實(shí)驗(yàn)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，推動(dòng)新型促血管化義眼座的研發(fā)。
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　本實(shí)驗(yàn)采用靜電吸引層層自組裝COL/HEP多層膜，將HA支架浸入到COL乙酸溶液，使HA多孔支架內(nèi)表面吸附上一層帶正電的COL，洗去多余的COL

3、。然后將材料置于HEP溶液中浸泡，以吸附一單分子層HEP，并使HA多孔支架內(nèi)表面帶上負(fù)電，再漂洗除多余的HEP。重復(fù)上述步驟，在HA多孔支架內(nèi)表面組裝5個(gè)COL/HEL雙分子層，分別對(duì)材料進(jìn)行材料學(xué)和生物學(xué)表征。
　　結(jié)果:
　　熱重分析測(cè)HA支架中COL、HEP組裝質(zhì)量百分比為0.87％。PBS中1周降解質(zhì)量百分比0.38％。萬(wàn)能測(cè)試儀表征材料力學(xué)性能，組裝后支架力學(xué)性能無(wú)明顯改變。通過(guò)掃描電鏡表征材料表面和多孔支架內(nèi)部結(jié)

4、構(gòu)。FITC熒光標(biāo)記COL，層層自組裝FITC-COL/HEP后，激光共聚焦顯微鏡證實(shí)COL-HEP多層膜均勻的分布在多孔支架孔壁上。用材料3D培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC），將細(xì)胞接種至多孔材料，96h后進(jìn)行FDA染色，熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，表明兩種材料均利于內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)，復(fù)合支架HUVEC粘附更多。以1天、3天、7天和2周為時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行MTT實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明組裝后支架有更好的生物相容性。初步構(gòu)建雞胚模型，評(píng)價(jià)眼座材料的體內(nèi)短期促血