利用脫細(xì)胞角膜基質(zhì)作為羥基磷灰石義眼座包裹材料的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　利用反復(fù)凍融+電泳法制備脫細(xì)胞角膜基質(zhì),同時初步觀察豬脫細(xì)胞角膜基質(zhì)(APCS)作為羥基磷灰石(HA)義眼臺包裹材料的可行性,為其在眼整形方面的臨床應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　方法:
　　1、采用反復(fù)凍融+電泳法去除豬角膜細(xì)胞成分,制備脫細(xì)胞角膜基質(zhì)(APCS),利用病理切片染色方法檢查其細(xì)胞去除和細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)保留情況,同時利用皮下植入法檢測其生物相容性;
　　2、將30只新西蘭白兔隨機(jī)分為A、B

2、2組,每組15只,各組均將HA義眼臺植入兔左眼眶內(nèi)。A組為對照組,植入自體鞏膜包裹的 HA義眼臺,B組植入APCS包裹的HA義眼臺。術(shù)后每天肉眼和裂隙燈顯微鏡檢查術(shù)眼,觀測眼瞼、結(jié)膜囊愈合情況及義眼臺有無暴露,并分別于術(shù)后1周、2周、3周、4周、5周對每組兔均進(jìn)行雙眼增強(qiáng)磁共振掃描,同時兩組各隨機(jī)取出1只義眼臺植入物行組織病理學(xué)檢查,比較植入義眼臺纖維血管化程度的差異。
　　結(jié)果:
　　1、新鮮豬角膜經(jīng)過脫細(xì)胞進(jìn)程處理,基質(zhì)

3、細(xì)胞已全部移除,細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)架保存良好(含前彈力層及前2/3基質(zhì)層),免疫反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:皮下植入后第2周,APCS組織周邊炎性細(xì)胞聚集明顯,以中性粒細(xì)胞為主,植入后4周,實(shí)驗(yàn)組與對照組均未發(fā)現(xiàn)明顯排斥反應(yīng), APCS組織中未見中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤,周圍包裹纖維結(jié)締組織,與周邊形成明顯界限。
　　2、術(shù)后1周,A、 B組均開始有不同程度的血管化,B組血管化速度緩慢,兩組磁共振掃描結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(A、B組間p<0.05)。術(shù)

4、后2周,兩組血管化程度都提高,但均未完全血管化,B組血管化程度稍低于 A組,兩組之間血管化差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(A、B組間p<0.05)。術(shù)后3周,兩組植入物血管化程度加深,較前有明顯提高,但未完全血管化,兩組之間的血管化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(A、B組間p>0.05)。術(shù)后4周及以后, A、B兩組均達(dá)到完全血管化,兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論:
　　1、利用反復(fù)凍融+電泳法能完全去除豬角膜基質(zhì)細(xì)胞,同時良好保留細(xì)胞外基質(zhì),使其結(jié)構(gòu)不受