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1、目的研究從穿透支原體(Mpe)提取的脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白(LAMPs)在體外誘導(dǎo)小鼠巨噬細胞表達誘導(dǎo)性一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA和蛋白及產(chǎn)生一氧化氮(NO)的水平,研究該膜蛋白能否激活經(jīng)其處理的小鼠巨噬細胞中的核因子kappa B(NF-κB)及誘導(dǎo)小鼠巨噬細胞發(fā)生凋亡的情況,以便了解Mpe潛在的致病性,并為進一步探索Mpe LAMPs誘導(dǎo)小鼠巨噬細胞表達iNOS及誘導(dǎo)巨噬細胞發(fā)生凋亡的分子機制提供試驗依據(jù).方法用從Mpe提取的LAM
2、Ps刺激小鼠巨噬細胞,用Griess試劑測定經(jīng)刺激后的小鼠巨噬細胞產(chǎn)生的NO水平,以RT-PCR、免疫細胞化學(xué)和Western blot等方法分析iNOS mRNA和蛋白的表達.用間接免疫熒光和Western blot檢測經(jīng)MpeLAMPs處理的小鼠巨噬細胞中NF-κB的激活和NF-κB的特異性抑制劑二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)對iNOS mRNA和蛋白的表達及產(chǎn)生NO的影響.用細胞凋亡檢測試劑盒檢測經(jīng)Mpe LAMPs處理的小鼠巨
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