人類肝門部膽管癌裸鼠瘤株的建立及其生物學(xué)特性研究.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文人類肝門部膽管癌裸鼠瘤株的建立及其生物學(xué)特性研究姓名：叢超申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師：吳小鵬20030330山東大學(xué)碩士學(xué)位論文人類rFl：f7部膽管癌裸鼠瘤株的建立及其生物學(xué)特性研究研究生叢超導(dǎo)師吳小鵬副教授專業(yè)外科學(xué)(普外)摘要目的：建立人肝門部膽管癌裸鼠瘤株模型，探討其生物學(xué)特性。方法：將手術(shù)切除的人肝fj@膽管癌標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，傳代。收集第40代、50代瘤細(xì)胞接種于4只Balb／c裸小鼠

2、后肢背側(cè)皮下。50天后，1只Balb／c裸小鼠后肢背側(cè)皮下移植瘤長至14x10mm，切取瘤組織移植于同系同品種Balb／c裸小鼠后肢背側(cè)皮下。記錄每代腫瘤生長的潛伏期，每5天測量腫瘤體積，記錄腫瘤外觀，裸鼠生活情況。處死荷瘤鼠時(shí)觀察有無肝、肺轉(zhuǎn)移并行病理檢查。各代瘤株行系列檢查并與人肝門部膽管癌標(biāo)本進(jìn)行比較并觀察腫瘤病理結(jié)構(gòu)；采用實(shí)體腫瘤體外直接分散法制備染色體，確定該瘤株核型及其眾數(shù)；透射電子顯微鏡觀察癌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)；酶聯(lián)免疫定量

3、檢測法檢測：糖鏈抗原199(CAl99)、糖鏈抗原125(CAl25)、癌胚抗原(CEA)及甲胎蛋白(AFP)；免疫組織化學(xué)(SABC)法測定血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、bcl2及P53蛋白，確定膽管癌瘸株表達(dá)上述腫瘤標(biāo)記物強(qiáng)度。繪制第1代至第5代肝門部膽管癌裸鼠瘤株生長曲線。結(jié)果：原代移植成功率為25％(1／4)，皮下移植腫瘤后，移植瘤體積縮小，經(jīng)28天潛伏期后，瘤株迅