細胞因子在心室重塑中的作用及卡維地洛干預的研究.pdf

1、第一部分:慢性心力衰竭患者循環(huán)細胞因子的變化及其與神經內分泌因子的關系 目的:研究慢性心力衰竭(CHF)患者血漿細胞因子的變化及其與腎素-血管緊張素-醛固酮系統(RAAS)及交感神經系統(SNS)之間的相關性和其臨床意義。 方法:雙抗體夾心ELISA法測定122例CHF患者及30例健康人血漿中腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-10(IL-10)的濃度，放免法測定血漿腎素活性(PRA)

2、、血管緊張素Ⅱ(AⅡ)、醛固酮(ALD)的濃度，熒光測定法測定血漿兒茶酚胺(CA)、去甲腎上腺素(NE)、腎上腺素(E)的濃度；超聲心動圖測量左室射血分數(LVEF)及左室舒張末期內徑(LVEDd)。 結果:(1)不同心功能級別CHF患者血漿中TNF-a水平均明顯高于對照組(P＜0.05或P＜0.01)，且隨著心衰程度的加重，TNF-a水平呈進行性增高；IL-6和IL-10水平在心功能Ⅲ，Ⅳ級組中均明顯高于對照組(P＜0.05或

3、P＜0.01)，而心功能Ⅱ級組與對照組相比無顯著性差異。TNF-a、IL-6與LVEF呈負相關(r=-0.513，r=-0.453，P＜0.01)，與心胸比率(HTR)呈正相關(r=0.501，r=0.438，P＜0.01)；與LVEDd呈正相關(r=0.342，r=0.304，P＜0.01)。(2)TNF-a與IL-6濃度呈正相關(r=0.618,P＜0.01)，TNF-a與IL-10濃度亦呈正相關(r=0.566，P＜0.01)，但

4、TNF-a與IL-10的比率(TNF-a/IL-10)也隨著心功能的惡化而升高，TNF-a的升高比IL-10的升高更為明顯。(3)心功能Ⅲ、Ⅳ級組CHF患者血中PRA、AII、ALD、CA、NE、E的濃度明顯高于對照組(P＜0.05或P＜0.01)；TNF-a與PRA、AⅡ、ALD、CA、NE呈正相關(P＜0.05或P＜0.01)，IL-6與PRA、ALD、CA、NE呈正相關(P＜0.05或P＜0.01)。 結論:CHF患者血中

5、細胞因子的變化與心衰的嚴重程度密切相關，TNF-a、IL-6可作為CHF嚴重程度的判斷指標之一。炎性細胞因子與抗炎性細胞因子之間的平衡失調可能參與了CHF的發(fā)生發(fā)展。RAAS、SNS與細胞因子之間相互聯系形成復雜的神經內分泌免疫網絡，該網絡的變化可能在CHF的病理生理機制中發(fā)揮了重要作用。 第二部分:卡維地洛對慢性心力衰竭患者循環(huán)細胞因子的影響 目的:探討卡維地洛對慢性心力衰竭(CHF)患者血漿細胞因子及心功能的影響。

6、 方法:將87例CHF患者隨機分為常規(guī)組和卡維地洛組，常規(guī)組給予常規(guī)抗心衰治療(ACEI、利尿劑、洋地黃等)，卡維地洛組在常規(guī)治療基礎上加用卡維地洛口服，按雙周劑量遞增方案，目標劑量25mg，bid，治療6個月。雙抗體夾心ELISA法測定兩組患者治療前后血漿腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-10(IL-10)水平，心臟超聲測心功能值，胸片測心胸比，細胞因子水平以健康人作對照。 結果:兩

7、組CHF患者治療前血漿TNF-a、IL-6、IL-10水平均高于健康對照組(P＜0.01)，治療6個月后卡維地洛組致炎性細胞因子TNF-a、IL-6水平降低，分別從治療前的46±18ng.L-1和35±13ng.L-1降至31±15ng.L-1和15±9ng.L-1，抗炎性細胞因子IL-10水平升高，從治療前的15±6ng.L-1升至24±7ng.L-1(P＜0.01)，TNFa/IL-10降低，從治療前的3.3±1.8降至1.4±0.

8、8，同時伴有心功能明顯改善(P＜0.01)。常規(guī)組心功能也有所改善，但差異不如卡維地洛組顯著，而其血漿細胞因子水平在治療前后差異無顯著性。 結論:卡維地洛降低炎性、增加抗炎性細胞因子的這種免疫調節(jié)作用可能是其對CHF有益作用的機制之一。 第三部分:心肌梗死后大鼠心肌組織細胞因子表達與心室重塑的關系及卡維地洛的干預作用 目的:探討心肌梗死后大鼠心肌炎性與抗炎性細胞因子和致纖維化性細胞因子及基質金屬蛋白酶(MMPs)

9、和膠原的變化，并觀察卡維地洛對心肌細胞因子表達和心室重塑的影響。 方法:將雄性Wistar大鼠左冠狀動脈前降支結扎，建立急性心肌梗死模型，存活24小時者隨機分為梗死對照組即非用藥組(MI-H20組)和梗死卡維地洛治療組(Carvedilolgroup，MI-C組)，另一組大鼠僅穿線不結扎，作為假手術組(SH組)，治療組給予卡維地洛生理鹽水溶解后灌胃(10mg-1.kg-1.d，一天兩次)，對照組和假手術組僅以等體積生理鹽水灌胃，

10、4周末時檢測各組大鼠血液動力學指標和心室相對質量，并分別用半定量RT-PCR、Westernblot、免疫組化和VG染色及明膠酶法檢測各組大鼠心肌細胞因子(TNFa、IL-1β、IL-6、TGF-β1和IL-10)基因和蛋白水平的表達及Ⅰ、Ⅲ型膠原和膠原容積分數以及MMPs的變化。 結果:心肌梗死后4周末大鼠心肌細胞因子基因和蛋白表達增加，非梗死區(qū)膠原容積分數(Collagenvolumefraction，CVF)增加，MMP-

11、2、MMP-9mRNA表達和活性增加，較假手術組比較有顯著性差異(P＜0.01)。大鼠心肌CVF和IL-1β表達呈正相關(r=0.68，P＜0.01)，MMP-9mRNA表達及活性均與TNF-a蛋白表達顯著正相關(r=0.52，P＜0.01)(r=0.725，P＜0.01)?？ňS地洛治療可降低心肌梗死后大鼠心肌致炎性細胞因子(TNFa、IL-1β、IL-6)和致纖維化性細胞因子(TGF-β1)的表達，降低心?、?、Ⅲ型膠原和CVF及MMP

12、-2、MMP-9mRNA的表達和活性，較非用藥組比較有顯著性差異(P＜0.01)，對抗炎性細胞因子IL-10基因表達無顯著影響，但可升高其蛋白表達水平，從而降低TNF-a/IL-10蛋白水平比值，同時改善血液動力學及心室重塑。 結論:細胞因子可能參與了心肌梗死后心室重塑，卡維地洛在降低梗死后心肌致炎性和致纖維化性細胞因子的表達以及升高抗炎性細胞因子的同時改善心室重塑(P＜0.01，P＜0.05)。卡維地洛有效改善心室重塑的作用機