Nestin調控多發(fā)性骨髓瘤細胞生物學行為的研究.pdf

1、多發(fā)性骨髓瘤是B細胞起源的、以骨髓克隆性漿細胞惡性增生和異常積累，并伴單克隆性免疫球蛋白增多為特征的一種衰竭性、不可治愈的惡性疾病。骨髓中惡性漿細胞的克隆性增殖和轉移、血漿和/或尿中出現(xiàn)單克隆蛋白及器官功能障礙是本病的主要特點。該病目前尚不能被徹底治愈，中位生存期大約為3～4年，是導致患者死亡的嚴重疾病之一，因此，能夠抑制甚至逆轉多發(fā)性骨髓瘤進展是醫(yī)學研究的重要目標。
　　巢蛋白(nestin)是最晚被識別的最大中間絲蛋白，其聚合

2、、解聚不僅能直接影響細胞內部的信號傳導，而且參與細胞周期中的如增殖、分化、遷移等重要過程。研究人員在對實體瘤的研究中發(fā)現(xiàn):nestin在腫瘤的發(fā)病也起到了至關重要的作用，能夠提示腫瘤的惡性程度，并可以作為腫瘤的診斷、預后的因素。令人意外的是，在多發(fā)性骨髓瘤患者體內成熟的漿CD138+CD38+細胞以及多種多發(fā)性骨髓瘤細胞系中，nestin亦有明顯的表達趨勢，但是nestin在多發(fā)性骨髓瘤中的作用并未得到系統(tǒng)的、科學的研究。目前，僅有研究

3、者推測在多發(fā)性骨髓瘤中的漿細胞的髓外遷移過程中，nestin可能發(fā)揮了類似的其在實體瘤中的功能，或在多發(fā)性骨髓瘤的惡性漿細胞的異常蛋白的非正常增生過程中起到特定的作用。
　　如上所述，我們在這些已有研究的基礎上，通過干預nestin的表達來初步探討其對多發(fā)性骨髓瘤生物學行為的影響，以便為治療多發(fā)性骨髓瘤探索新的標靶。
　　目的：
　　探討nestin對多發(fā)性骨髓瘤細胞增殖、分化、侵襲及凋亡的生物學行為的影響，評價nes

4、tin的表達在多發(fā)性骨髓瘤中所起到的生物學作用，推斷其對多發(fā)性骨髓瘤疾病發(fā)生、發(fā)展的生物學意義。
　　方法：
　　培養(yǎng)已被證實有nestin表達的多發(fā)性骨髓瘤細胞系U266，以nestin-siRNA轉染的方式抑制其nestin表達。轉染模型構建成功后，分別以MTS法，腫瘤細胞侵襲實驗及流式細胞分析等方法檢定并比較基因沉默前后多發(fā)性骨髓瘤細胞的增殖、侵襲、周期及凋亡情況。
　　結果：
　　在nestin基因沉默后

5、，與空白對照組相比，多發(fā)性骨髓瘤細胞系細胞的增殖和侵襲水平有著明顯的下降(94.82％±1.70％vs74.55％±2.19％，P＜0.05;376.33±44.38vs105.67±18.15，P＜0.05);凋亡率上升(11.46％±1.09％vs37.98％±4.28％，P＜0.05)。細胞周期較多的停滯于G2/M期(21.06％±1.86％vs54.83％±7.56％，P＜0.05)，同時細胞凋亡的比率明顯升高(11.65％±2