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1、目的:本研究在體外培養(yǎng)人牙齦成纖維細(xì)胞(human gingival fibroblasts,HGF)的基礎(chǔ)上,用ELISA法檢測(cè)Cox-2(cyclooxygenase-2)選擇性抑制劑塞來(lái)昔布對(duì)脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激下HGF分泌炎癥細(xì)胞因子PGE2(prostaglandin E2)及IL-6(interleukin-6)的抑制作用,探討塞來(lái)昔布在牙周炎治療中的可行性及其作用機(jī)制,為臨床上使用塞
2、來(lái)昔布輔助治療牙周炎提供參考資料和理論依據(jù)。 方法:培養(yǎng)人原代牙齦成纖維細(xì)胞,取第5-8代用于實(shí)驗(yàn)。利用不同濃度(1,10,100,1000,10000ng/ml)LPS刺激HGF產(chǎn)生炎癥細(xì)胞因子,模擬牙周炎的微環(huán)境,在6,12,24小時(shí)三個(gè)時(shí)間段,提取細(xì)胞上清液,采用ELISA法檢測(cè)上清液中PGE2及IL-6的分泌量,找出LPS的最佳誘導(dǎo)時(shí)間及濃度。在此基礎(chǔ)之上,將50,100,200,400ug/ml的塞來(lái)昔布分別加入細(xì)胞中
3、,12小時(shí)后采用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液中PGE2及IL-6的分泌量,并采用單因素方差分析分析數(shù)據(jù)。 結(jié)果: 1、LPS能有效地刺激人牙齦成纖維細(xì)胞分泌PGE2及IL-6,PGE2分泌量以時(shí)間和劑量依賴的方式遞增,在24小時(shí)達(dá)峰值。IL-6的分泌量在0-12小時(shí)以時(shí)間和劑量依賴的方式遞增,12小時(shí)達(dá)峰值,以后逐漸減少(p<0.05)。 2、塞來(lái)昔布能有效地抑制HGF分泌PGE2和IL-6,在12小時(shí),50ug/
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