血管瘤分子機(jī)制的初步研究及其臨床應(yīng)用.pdf

1、上海第二醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文血管瘤分子機(jī)制的初步研究及其臨床應(yīng)用姓名：張莉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：外科學(xué)，整形外科指導(dǎo)教師：王煒2003.5.1圭塑苧三墨型盔堂!!!!絲堡主生里些笙奎一—————————J苧!!哩1將4096條cDNA用點(diǎn)樣儀點(diǎn)在特制玻片上制備成表達(dá)譜芯片；將同一血管瘤患兒的增生期和消退期瘤體組織的mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA、分別標(biāo)記Cy3和Cy5兩種熒光，制備成cDNA探針，與表達(dá)譜芯片進(jìn)行雜交，通過(guò)計(jì)算機(jī)掃描、數(shù)據(jù)處

2、理篩選出差異表達(dá)的基因。通過(guò)查閱文獻(xiàn)對(duì)它們進(jìn)行綜合分析，從中找出血管瘤從增生轉(zhuǎn)化為消退的分子途徑、機(jī)制。2對(duì)59例增生期血管瘤、38例消退期血管瘤、18例血管畸形、12例陰性對(duì)照患兒的血清VEGF進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)檢查，測(cè)定他們的血清VEGF濃度。3對(duì)69例增生期血管瘤、4l例消退期血管瘤、23例血管畸形、11例陰性對(duì)照患兒的尿bFGF進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(E

3、LISA)檢查，測(cè)定他們的尿bFGF濃度。結(jié)果1基因芯片結(jié)果：差異表達(dá)的基因有194條，其中115條基因上調(diào)，79條下調(diào)，增生期與消退期基因表達(dá)譜的改變初步反映了血管瘤增生與自然消退的分子機(jī)制：(1)增生期一些細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子高表達(dá)；(2)消退期細(xì)胞凋亡因子表達(dá)增加，并有免疫防御反應(yīng)發(fā)生，以清除體內(nèi)的增生性細(xì)胞；(3)血管形成和原癌基因參與血管瘤的增生，其中還發(fā)生細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)的粘附；(4)線(xiàn)粒體激活的細(xì)胞凋亡通路和Wnt／Beate