丙二醛在繼發(fā)性脊髓損傷中的表達及其意義.pdf

1、目的：
　　 脊髓損傷是人類嚴重致殘和死亡的重要原因,急性脊髓損傷后常繼發(fā)多種神經(jīng)生化改變,這些改變在加重脊髓繼發(fā)性損傷中起重要作用。近來自由基在參與脊髓繼發(fā)性損傷方面越來越受到人們的重視。本研究旨在建立鼠靜壓型脊髓損傷模型的基礎上,動態(tài)觀察脊髓損傷后脊髓內(nèi)丙二醛(malonydialdehyed,MDA)表達的含量變化以探討脊髓繼發(fā)性損傷的病理機制。
　　 材料和方法：
　　 健康雄性SD大鼠70只,體重250

2、±20克隨機分為對照組10只損傷組60只,采用靜壓型大鼠SCI模型。各組大鼠分別于、傷后12小時、48小時、5天、7天、14天、21天,各時段通過頸動脈放血處死。采用蘇木精-伊紅染色后,觀察病理學改變,脊髓中MDA檢測:放血處死后,迅速取各時點受損節(jié)段脊髓組織MDA測定采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法。數(shù)據(jù)采用SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計軟件處理。所有均數(shù)以-X±S表示,不同時點組內(nèi)組間均數(shù)比較采用單因素方差分析。

3、>　　 結果：
　　 肉眼可見大鼠脊髓損傷局部組織充血。鏡下可見SCI后12～48小時損傷局部神經(jīng)元核固縮,胞體縮小,胞質(zhì)深伊紅染色,成為紅色神經(jīng)元。傷后2～5天,軸突腫脹,出現(xiàn)空泡,白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)髓鞘散亂、崩解破裂。傷后7～14天膠質(zhì)細胞增生明顯,可見衛(wèi)星現(xiàn)象及鬼影細胞。傷后14～21天,損傷段脊髓變細部分灰質(zhì)崩解壞死,可見囊腔形成。對照組MDA含量為(22.03±2.98)μmol/g;傷后12h脊髓組織MDA含量立即升高,7

4、d時升至最高峰,升幅達90％,隨后逐漸下降,傷后21d恢復并接近傷前水平(t=1.983,P＞0.05)。各組之間的MDA水平不等或不全等(F=70.671 P＜0.01)。MDA值在7天內(nèi)顯著升高,并與損傷時間呈直線相關(r=0.765 p＜0.05)討論機體在創(chuàng)傷、腫瘤等病理狀態(tài)下,氧穩(wěn)態(tài)的平衡都會受到相當?shù)挠绊憽τ谘醴€(wěn)態(tài)的失衡,機體會啟動內(nèi)源性的調(diào)控機制。SCI后自由基介導的脂質(zhì)過氧化反應在繼發(fā)性反應中占有非常重要的地位,可以使

5、脊髓血流量進一步減少、水腫加劇,引起嚴重神經(jīng)結構與功能損傷甚至器質(zhì)性壞死,從而使神經(jīng)功能永久喪失。所以自由基與脂質(zhì)過氧化損傷學說在脊髓損傷發(fā)病機制中尤受重視。丙二醛(Malonyldialdehyde,MDA)作為脂質(zhì)過氧化最終產(chǎn)物,可直接反應體內(nèi)自由基的變化和機體受自由基攻擊的嚴重程度。有研究發(fā)現(xiàn),損傷后早期脊髓MDA的含量就可以明顯升高。
　　 本實驗結果顯示,MDA含量傷后12h脊髓組織MDA含量立即升高,7d時升至最高峰

6、,升幅達90％,隨后逐漸下降,傷后21d恢復并接近傷前水平。MDA值在7天內(nèi)顯著升高,并與損傷時間呈直線相關。脊髓組織膜結構含有豐富的脂質(zhì),脊髓損傷使神經(jīng)細胞線粒體氧化還原酶系脫耦聯(lián)產(chǎn)生大量氧自由基,后者易攻擊脂質(zhì)引發(fā)過氧化反應,從而破壞膜結構的完整性,MDA是脂質(zhì)過氧化的最終產(chǎn)物,測定MDA可直接反映自由基水平,其含量高低是組織細胞損傷的重要標志。對繼發(fā)性脊髓損傷的脊髓組織進行病理學觀察發(fā)現(xiàn),鏡下可見SCI后12～48小時損傷局部神經(jīng)

7、元核固縮,胞體縮小,胞質(zhì)深伊紅染色,成為紅色神經(jīng)元。傷后2～5天,軸突腫脹,出現(xiàn)空泡,自質(zhì)內(nèi)神經(jīng)髓鞘散亂、崩解破裂。傷后7～14天膠質(zhì)細胞增生明顯,可見衛(wèi)星現(xiàn)象及鬼影細胞。傷后14～21天,損傷段脊髓變細部分灰質(zhì)崩解壞死,可見囊腔形成。實驗結果說明,在傷后12小時脊髓過氧化反應已經(jīng)開始,隨著脊髓損傷的時間的增加,脊髓過氧化反映逐漸加重,病理學觀察顯示此時脊髓損傷已經(jīng)開始。在第7天左右氧化反應到達高峰,MDA水平最高,此時病理學觀察發(fā)現(xiàn),

8、脊髓損傷逐漸加重。在傷后21天時,脊髓的過氧化反映基本停止,但根據(jù)病理學結果發(fā)現(xiàn),此時脊髓損傷程度已經(jīng)達到高峰。
　　 因此我們認為,繼發(fā)性脊髓損傷病理學改變與脂質(zhì)過氧化反應密切相關。從而表現(xiàn)出自由基在脊髓損傷中的重要性。
　　 結論：
　　 脊髓損傷后丙二醛(MDA)表達開始升高,丙二醛(MDA)表達與繼發(fā)性脊髓損傷缺血缺氧及病理變化密切相關。其表達規(guī)律與損傷時間具有相關性。MDA可能參與了神經(jīng)元的保護與修復過