CtIP蛋白在肝癌組織中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：探討DNA雙鏈斷裂修復(fù)途徑中關(guān)鍵蛋白CtIP在人肝癌組織中的表達(dá)情況,同時(shí)結(jié)合臨床特征分析其在肝癌發(fā)生發(fā)展中的意義。
　　方法：
　　1.應(yīng)用免疫組化親和素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物(SABC)三步法技術(shù)檢測(cè)60例肝癌組織及其對(duì)應(yīng)的癌旁組織中CtIP蛋白的表達(dá)水平。
　　2.應(yīng)用Western-blot蛋白印跡實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)上述2種組織的CtIP蛋白的表達(dá)水平。
　　3.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-ti

2、me PCR)技術(shù)檢測(cè)上述60例肝癌患者的肝癌組織和相應(yīng)癌旁組織中CtIP mRNA的表達(dá)水平。
　　4.分析CtIP蛋白表達(dá)水平與肝癌臨床特征之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.免疫組化實(shí)驗(yàn)顯示CtIP蛋白陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞胞核和胞質(zhì),主要位于細(xì)胞胞核中,肝癌細(xì)胞中染色呈棕黃色粗大的團(tuán)塊狀或顆粒狀,癌旁組織陽(yáng)性染色明顯弱于肝癌組織,呈淡棕色。間質(zhì)細(xì)胞未見(jiàn)明顯陽(yáng)性染色。60例肝癌組織中有38例CtIP蛋白表達(dá)陽(yáng)性,陽(yáng)性率

3、為63.3％;對(duì)應(yīng)的癌旁組織中有15例表達(dá)陽(yáng)性,陽(yáng)性率為25.0%,兩者間具有顯著性差異(p<0.05)。
　　2.Western-blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)120KDa處有一特異性條帶,肝癌組織中CtIP蛋白表達(dá)條帶的深度明顯高于癌旁組織,測(cè)定灰度值并定量分析結(jié)果顯示,肝癌組織CtIP蛋白相對(duì)表達(dá)量高于癌旁組織,兩者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),與免疫組織結(jié)果一致。
　　3.60例肝癌及對(duì)應(yīng)癌旁組織標(biāo)本中,肝癌組織CtIP蛋白

4、mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯高于癌旁組織,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　4.分析CtIP蛋白的表達(dá)與肝癌的臨床特征的關(guān)系發(fā)現(xiàn):CtIP蛋白表達(dá)水平與患者有無(wú)包膜和肝內(nèi)、淋巴結(jié)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)(p﹤0.05),而與性別、腫瘤直徑大小和Edmondson分級(jí)無(wú)關(guān)(p﹥0.05)。
　　結(jié)論：CtIP蛋白及其mRNA在肝癌組織中的表達(dá)水平顯著高于相應(yīng)癌旁組織,這種表達(dá)異?？赡芘c人類肝癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移有關(guān),對(duì)臨床診斷和治療有一定