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文檔簡介
1、本研究分為二部分: 第一部分:實驗性大鼠大腸癌機體免疫功能的改變 目的:模擬人類大腸癌的形成,建立一種大腸癌的模型并探討實驗性大腸癌時機體免疫功能變化。 方法:利用1,2-二甲肼(DMH)誘導S-D大鼠建立大腸癌模型,10只大鼠隨機分2組,每組5只:(1)對照組;(2)成瘤組(DMH組)。從實驗第1周開始,成瘤組每周皮下注射1次DMH,劑量為20mg/kg,注射部位為右下肢皮下,連續(xù)20周,對照組大鼠則注射相同體
2、積的1mmol/L的EDTA溶液。觀察21周各組大鼠大腸腫瘤發(fā)生情況并HE染色進行病理檢查。流式細胞(FCM)檢測16周、21周外周血和21周脾臟中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD25+的表達率,ELISA法檢測21周各組脾細胞經PHA刺激72h后分泌IFN-γ的能力。 結果:21周時處死大鼠并對大鼠的腸道進行解剖,結果表明利用該方法的誘癌率達100%(5/5),對照組僅1只發(fā)現兩枚腺瘤。16周時成瘤組
3、外周血CD3+和CD3+CD4+較對照組表達率略有降低,但兩者無統(tǒng)計學意義(P>0.05);21周時成瘤組外周血CD3+CD4+、CD4/CD8和脾臟中CD3+CD4+、CD3+CD25+、CD4/CD8較對照組明顯降低(P<0.05);成瘤組脾細胞PHA刺激72h后分泌IFN-γ的能力較對照組有顯著的下降(P<0.01)。 結論:利用DMH成功建立了S-D大鼠的大腸癌模型,證明了實驗性大鼠大腸癌同人類大腸癌具有類似的免疫功能降
4、低,主要是細胞免疫功能的下降。 第二部分:茶多酚對實驗性大腸癌的免疫功能影響和成瘤預防作用研究 目的:大量研究表明茶多酚(Tea Polyphenols,TPs)能提高機體的免疫功能。通過第一部分研究證實DMH誘導的實驗性大腸癌與人類大腸癌相似,機體的免疫功能處于抑制狀態(tài),本部分研究旨在探討茶多酚對荷大腸癌大鼠免疫功能的影響,在此基礎上,探討茶多酚對大腸癌形成過程中的預防作用。 方法:利用DMH誘導S-D大鼠建立
5、大腸癌模型,10只大鼠隨機分2組,每組5只:(1)成瘤組;(2)茶多酚組。茶多酚組從實驗第1天起以0.1%(W/V)的茶多酚水溶液作為唯一飲用水,2組均每周同一時間皮下注射1次DMH,劑量為20mg/kg,注射部位為右下肢皮下,連續(xù)20周。觀察21周各組大鼠大腸腫瘤發(fā)生情況并行病理學檢查。流式細胞(FCM)檢測各組16周、21周外周血和21周脾臟中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD25+的表達率,ELISA法檢測
6、21周各組脾細胞經PHA刺激72h后分泌IFN-γ的能力。 結果:21周時茶多酚組和成瘤組的全部大鼠誘導出大腸腫瘤,茶多酚組肉眼可見平均大腸腫瘤和平均腺癌數明顯低于成瘤組(P<0.05)。病理證實茶多酚組和成瘤組誘癌率分別是80%(4/5)和100%(5/5),茶多酚組Dukes分期明顯好于成瘤組,多為B-C期,而成瘤組大多是D期。茶多酚組16周外周血CD3+CD25+較成瘤組明顯升高(P<0.05);茶多酚組21周外周血CD3
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