辛伐他汀干預下對大鼠動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)高遷移率族蛋白1表達的影響.pdf

1、目的：
　　 1、探討最佳的動脈粥樣硬化大鼠模型的制作方法，觀察粥樣硬化斑塊的組織病理學變化。
　　 2、觀察動脈粥樣硬化大鼠高遷移率族蛋白1(HMGB-1)的蛋白及基因表達變化，以揭示與炎癥相關(guān)的動脈粥樣硬化發(fā)病機制。
　　 3、觀察辛伐他汀對動脈粥樣硬化大鼠HMGB-1的蛋白及基因表達及斑塊形態(tài)學的影響，以揭示辛伐他汀對動脈粥樣硬化的保護作用機制。
　　 方法：
　　 1.采用單純高脂飲食飼養(yǎng)

2、、維生素D3連續(xù)灌胃結(jié)合高脂飲食飼養(yǎng)、維生素D3每周間隔灌胃結(jié)合高脂飲食飼養(yǎng)三種方法誘導動脈粥樣硬化大鼠模型，比較三種方法的模型建立情況，HE染色觀察大鼠主動脈血管動脈粥樣硬化斑塊的組織病理學變化。
　　 2.免疫組織化學染色法觀察大鼠主動脈血管動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)HMGB-1的蛋白表達情況，real-time PCR法檢測大鼠主動脈血管HMGB-1的基因表達變化。
　　 3.辛伐他汀2.5mg/(kg.d)灌胃進行干預，

3、分別給藥2周、4周，應(yīng)用上述方法進行組織病理學觀察及HMGB-1的蛋白及基因表達檢測。
　　 結(jié)果：1、動脈粥樣硬化大鼠模型成功：單純高脂飼料喂養(yǎng)大鼠2個月體重增長不明顯，留取主動脈標本，見主動脈內(nèi)膜光滑，未見斑塊形成，高脂飼料喂養(yǎng)同時加維生素D3灌胃后2個月后可見主動脈內(nèi)膜明顯鈣化斑塊，呈環(huán)狀，斑塊遍及整條動脈。2、辛伐他汀干預后可明顯抑制斑塊形成：2周干預組可見斑塊面積明顯減少，4周干預組斑塊面積較2周組進一步減少，呈粟粒狀

4、，部分僅表現(xiàn)為內(nèi)膜不光滑，未見明顯斑塊形成。3、HMGB-1在動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)的表達：(1)免疫組化：正常血管壁內(nèi)存在HMGB-1表達，位于血管內(nèi)皮細胞，平滑肌細胞和成纖維細胞的細胞核內(nèi)，動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)HMGB-1分部不均勻，炎癥細胞浸潤區(qū)和壞死區(qū)周邊基質(zhì)內(nèi)表達明顯增高，炎癥細胞浸潤區(qū)內(nèi)以單核細胞-巨噬細胞胞核、胞漿和間質(zhì)內(nèi)表達為主，后者成條帶狀分布于壞死區(qū)邊緣，單純高脂飲食組斑塊內(nèi)HMGB-1表達較辛伐他汀4周組表達陽性率顯著升

5、高，辛伐他汀2周組HMGB-1表達較單純高脂飲食組明顯減少，但較辛伐他汀4周組高。(2) HMGB2在動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)基因水平的表達：RT-PCR法檢測各組動脈內(nèi)HMGB-1表達，與空白對照組比較，其余各組HMGB-1水平均明顯升高，差異有顯著性(P<0.01)，辛伐他汀干預組HMGB-1表達明顯低于低單純高脂飲食組(P<0.01)，但均明顯高于空白對照組，2周組HMGB-1表達高于4周組(P<0.01)。
　　 結(jié)論：