人乳腺癌腫瘤干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性之初探.pdf

1、第一部分人乳腺癌腫瘤干細(xì)胞的分離培養(yǎng) 目的：在原代分離出的乳腺癌腫瘤細(xì)胞中分選出CD44<'+>CD24<'-/LOW>表達(dá)的細(xì)胞，并計(jì)算出CD44<'+>CD24<'-/LOW>細(xì)胞，CD44<'+>CD24<'+>細(xì)胞和CD44<'->細(xì)胞的數(shù)量比例。初步認(rèn)定CD44<'+>CD24<'-LOW>細(xì)胞可能是干細(xì)胞。 方法：通過(guò)機(jī)械分離，酶消化法在乳腺癌腫瘤組織中分離出乳腺癌腫瘤細(xì)胞；將其培養(yǎng)后運(yùn)用免疫磁珠兩步法，分離

2、出CD44<'+>CD24<'-/LOW>細(xì)胞，通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)，分別計(jì)算CD44<'+>CD24<'-/LOW>細(xì)胞，CD44<'+>CD24<'+>細(xì)胞和CD44<'->細(xì)胞的數(shù)量比例。 結(jié)果：在乳腺癌腫瘤原代細(xì)胞中分離出了CD44<'+>CD24<'-LOW>細(xì)胞。CD44<'+>CD<,24><'-/LOW>細(xì)胞數(shù)量約占2.5％，而CD44<'+>CD<,24><'+>細(xì)胞約占30％左右，CD<,44><'->細(xì)胞混合群約占

3、67.5％左右。 結(jié)論：乳腺癌組織中有CD44<'+>CD24<'-LOW>細(xì)胞，且CD44<'+>CD24<'-/LOW>細(xì)胞可能是人乳腺癌腫瘤干細(xì)胞。 第二部分人乳腺癌腫瘤干細(xì)胞(CD44+CD24-/LOW)生物學(xué)特性之初探 目的：對(duì)比從原代分離出來(lái)的乳腺癌腫瘤細(xì)胞中分選出的CD44<'+>CD24<'-/LOW>細(xì)胞與CD44<'+>CD24<'+>細(xì)胞和CD44<'->細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖能力，運(yùn)用電子顯微鏡

4、觀察3群細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)，并探討三群細(xì)胞ER．PR， HER-2的表達(dá)情況。 方法：培養(yǎng)剛分選完畢的CD44<'+>CD24<'-/LOW>細(xì)胞，CD44<'+>CD24<'+>細(xì)胞和CD44<'->細(xì)胞，繪制三群細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線；以光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡觀察三群細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)。并以免疫組化方法測(cè)定三群細(xì)胞的ER，PR，HER-2的表達(dá)。 結(jié)果：根據(jù)3群細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線發(fā)現(xiàn)，在相同培養(yǎng)條件下，CD44<'+>CD24<'-/L

5、OW>細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖能力最強(qiáng)，CD44<'+>細(xì)胞能力最弱；通過(guò)透射電子顯微鏡觀察，CD44<'+>CD24<'-/LOW>細(xì)胞的細(xì)胞核大而圓，核漿比大于1/2．核仁顏色深濃，細(xì)胞器少，游離多聚核糖體豐富，細(xì)胞微絨毛稀少短小。CD44<'+>CD24<'-/LOW>細(xì)胞的ER，PR，HER-2均為陰性，而與腫瘤組織的ER(++)，PR(-)，HER-2(-)表達(dá)不同。 結(jié)論：CD44<'+>CD24<'-/LOW>細(xì)胞是腫瘤生長(zhǎng)